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脂联素对肾缺血再灌注小鼠肾纤维化的影响。
方法雄性C57BL/6小鼠48只,8周龄,体重20~25 g,采用随机数字表法分为4组(n=12):对照组(C组)、脂联素组(APN组)、缺血再灌注组(I/R组)和缺血再灌注+脂联素组(I/R+APN组)。采用阻断左侧肾蒂30 min再灌注法制备肾脏缺血再灌注损伤模型。I/R+APN组于缺血前15 min和再灌注每24 h腹腔注射APN蛋白球状片段5 μg/g,连续2周;C组分离左侧肾脏,但不夹闭肾蒂,C组和I/R组与相应时点腹腔注射等量生理盐水。APN组分离左侧肾脏,但不夹闭肾蒂,给药方法同I/R+APN组。于再灌注后48 h时,取左侧肾组织,行肾小管损伤评分,采用TUNEL法检测凋亡指数(AI)。再灌注2周时取肾组织,分别行天狼星红饱和苦味酸(Sirus red)染色和蛋白定量,计算肾间质胶原沉积面积占视野内肾小管间质总面积的百分比(Sirus red面积百分比),评估左侧肾脏纤维化程度;Western blot法测定Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)、α-平滑肌动蛋白(α-SMA)和纤维连接蛋白(FN)的表达水平。
结果与C组比较,I/R组和APN+I/R组肾小管损伤评分、AI和Sirus red面积百分比升高,肾组织COL-Ⅰ、α-SMA和FN表达上调(P<0.05),APN组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与I/R组比较,APN+I/R组肾小管损伤评分、AI和Sirus red面积百分比降低,肾组织COL-Ⅰ、α-SMA和FN表达下调(P<0.05)。
结论脂联素可减轻肾缺血再灌注小鼠肾纤维化。