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作者简介：李桂明（1980-），男，助理研究员，硕士，研究方向为新兽药研发。
通讯作者：宋敏训（1963-），男，研究员，博士，主要研究方向为禽病诊断与新兽药研发。
摘要：自行研制的环糊精包合碘具有有效碘含量高、质量稳定和刺激性小等优点。参考《消毒技术规范2002版》的方法，分别以木质桌面、自然水体和鸡舍为消毒对象，验证其临床消毒效果。结果表明，环糊精包合碘1∶ 800倍（W/V）样品稀释液，对木质桌面消毒作用10 min，对物体表面自然菌的平均杀灭对数值为243；1∶ 10 000倍（W/V）投入自然水体，10 min大肠杆菌杀灭率为100%，10～30 min自然菌杀灭率为9965%～100%；1∶ 500倍（W/V）样品稀释液，60 min对鸡舍地面、墙壁自然菌杀灭率为9273%和9358%。
关键词：环糊精包合碘；消毒；自然菌
中图分类号：S857.12+3 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2013）06-0099-03
在畜禽养殖过程中，碘制剂以其消毒效果好、毒副作用低、刺激性小、无残留[1，2]以及无生态毒性等优点而被广泛应用。其中，季铵盐碘和聚维酮碘目前已在临床中广泛使用[3]。但有机络合碘制品有效碘释放率较低、环境消毒成本高，制约了在兽医临床中的推广应用[4]。“环糊精包合碘”是碘单质被β-环糊精包合形成的超分子结构，其有效碘（I）含量高、稳定性好、水溶性强。本试验参考《消毒技术规范2002》进行物体表面消毒、水体消毒和鸡舍消毒试验，验证其消毒效果，为开发新型消毒剂提供有效依据，降低畜禽传染病对养殖业的危害，保障食品安全。1 材料与方法11 试剂与仪器
111 物体表面消毒 消毒剂：环糊精包合碘（有效碘169%）稀释成1∶ 800倍，山东省农业科学院家禽研究所提供。
中和剂：含05%硫代硫酸钠+02%卵磷脂+3%吐温-80的磷酸盐缓冲液。
培养基：胰蛋白胨大豆琼脂培养基。
稀释液：02%吐温-80磷酸盐缓冲液（PBS）。
无菌棉拭子：一次性医用棉签灭菌后备用。
规格板：50 mm × 50 mm无菌不锈钢规格板。
受试对象：山东省实验动物中心微生物准备室木质桌面。
112 水体消毒 消毒剂：环糊精包合碘（有效碘169%），稀释成1∶ 10 000倍，山东省农业科学院家禽研究所提供；以聚维酮碘为对照消毒剂。
中和剂：含05%硫代硫酸钠+02%卵磷脂+3%吐温-80的磷酸盐缓冲液。
自然菌采用营养琼脂培养基，大肠杆菌采用麦康凯培养基。
受试对象：济南郊区自然水样。
113 鸡舍消毒 消毒剂：环糊精包合碘（有效碘169%）稀释成1∶ 500倍，山东省农业科学院家禽研究所提供。
试验动物与条件：200只50日龄育成鸡，鸡舍长×宽×高=3 m × 57 m × 28 m。
培养基：营养琼脂培养基。
无菌棉拭子：一次性医用棉签灭菌后备用。
培养皿：统一采用内径90 mm培养皿。
12 试验方法
121 物体表面消毒 参考《消毒技术规范》（2002年版） 2129，将规格板放于木质桌面，30个区块作为阳性对照区，样本不擦拭消毒液进行采样；30个区块为试验区，将配好的消毒液对木质桌面喷洒至湿润，消毒作用10 min。用棉拭子涂抹法进行采样，统计自然菌落数，计算杀灭对数值。另设阴性对照，即将同批次中和剂、稀释液各取10 ml培养基，检测中和剂和稀释液中是否有自然菌。
杀灭对数值=消毒前菌数对数值-消毒后菌数对数值
122 水体消毒 取9份水样，每份水样1 L，其中4份分别加入01 g的环糊精包合碘，另外4份加入01 g聚维酮碘，1份不加消毒剂，搅拌均匀，记录时间。根据加入消毒剂时间，第1份水样加入环糊精包合碘10 min后加入中和剂，迅速取样，进行原液、1∶ 10、1∶ 100三个浓度进行计数；第2份20 min后加入中和剂，同样方法进行细菌计数，依次类推。聚维酮碘采取相同办法。每个浓度重复2次，计算平均值。不加消毒剂及加入消毒剂后不同时间点进行自然菌和大肠杆菌培养计数。
123 鸡舍消毒 地面消毒先由外向内喷雾1次，喷药量为250 ml/m2，待室内消毒完毕后，再由内向外重复喷雾1次。墙壁消毒喷洒量为100 ml/m2。 于消毒前、消毒30 min、60 min进行采样。空气5个点（墙角12 m处4个点加室中心1个点）、地面3个点（东、中、西）、墙面4个点（12 m处4个墙角）。空气采样参考GB/T 17093-1997采用自然沉降法；墙面和地面采样方法如下：将无菌棉拭子在含 10 ml 稀释液（09%生理盐水）试管中浸湿，于管壁上挤干，对采样区（选定5 cm×5 cm范围）涂抹采样，横竖往返各 8次。采样后，以无菌操作方式将棉拭采样端剪入原稀释液试管内，电动混匀器振荡20 s或在手掌振打200次，做适当稀释后备用。采样后实验室进行自然菌计数，计算单位体积（或面积）的自然菌数。
2 结果与分析
21 物体表面消毒效果
由表1可知，所试环糊精包合碘1∶ 800倍（W/V）样品稀释液，对木质桌面喷洒至湿润，消毒作用10 min，其物体表面自然菌的杀灭对数值
综合分析数据，杀灭对数值基本在平均值附近，考虑菌落计数的实际操作误差，认为本次试验可以证明环糊精包合碘对物体表面消毒有效。22 水体消毒效果
由表2可知， 10 min环糊精包合碘和聚维酮碘对自然菌杀灭率为9965%和9947%，20 min均为9982%，30 min杀灭率则为100%；环糊精包合碘和聚维酮碘均能在10 min内杀灭水体大肠杆菌。环糊精包含碘在效用上与市面流行的产品——聚维酮碘消毒效果相当，但环糊精包合碘为水溶性、成本低，所以推定新型杀毒剂环糊精包合碘水体消毒效果良好。 23 鸡舍消毒效果
由表3可知，30 min地面和墙面自然菌杀灭率为7971%和7775%，60 min杀灭率分别为9273%和9358%。可以看出，30 min时地面自然菌杀灭率较墙面高，可能是由于液体存留地面起到较长时间的消毒效果；60 min时地面自然菌杀灭率反而较低，可能是由于随着时间的推移，地面更易受菌落沉降的影响。同时发现，该新型消毒剂对空气也有一定的杀菌作用，30 min和60 min自然菌杀灭率分别为1767%和1164%，但是杀灭效果不理想。
3 结论与讨论
桌面消毒试验用于鉴定消毒剂对一般物体表面自然菌的杀灭作用，以验证消毒剂的使用剂量。本试验所试环糊精包合碘1∶ 800倍（W/V）样品稀释液，对木质桌面喷洒至湿润，消毒作用10 min，对物体表面自然菌的平均杀灭对数值为243，>10，符合2002年版《消毒技术规范》的要求。熊鸿燕等（1999）[5]采用交联淀粉碘（有效碘含量6393 mg/g）为消毒剂对自来水进行消毒试验， 结果认为5 g/L（有效碘含量为每升水3197 mg）作用5～10 min可杀灭自然菌的9973% ～ 9994%。本试验有效碘含量为每升水169 mg，10 min杀灭率达到9965%，取得了较好的杀菌效果。在鸡舍中使用环糊精包合碘对墙面和地面进行消毒，60 min自然菌杀灭率达到92%以上。同时发现，本消毒剂对空气自然菌具有一定的杀灭作用，但杀灭作用有限；60 min空气中细菌总数反而多于30 min，推测随着时间的延长粪便中的细菌继续扩散至空气中，在下一步试验中需要增加空气喷雾消毒以达到消毒效果。参 考 文 献：
[1] Durani P，Leaper DPovidone-iodine： use in hand disinfection， skin preparation and antiseptic irrigation[J]Int Wound J， 2008，5（3）： 376-87
[2] Mbithi J N， Springthorpe V S， Satta S A rChemical disinfection of hepatitis a virus on environmental surfaces[J]Appl Envir Microbiol， 1990，56： 3601-3604
[3] Elisabeth P， Miranda S， Michaela E， et al Effects of alcohols， povidone-iodine and hydrogen peroxide on biofilms of Staphylococcus epidermidis[J] J Antimicrob Chemother，2007，60： 417-420
[4] Maenthaisong R， Chaiyakunapruk N， Thamlikitkul V Cost- effectiveness analysis of chlorhexidine gluconate compared with povidone-iodine solution for catheter-site care in Siriraj Hospital， Thailand[J] J Med Assoc Thai， Nov， 2006， 89 Suppl 5： S94-101
[5] 熊鸿燕， 张 凌， 刘育京， 等交联淀粉碘的制备及对水中细菌杀灭效果的研究[J]中国消毒学杂志，1999，16（1）：1-6
通讯作者：宋敏训（1963-），男，研究员，博士，主要研究方向为禽病诊断与新兽药研发。
摘要：自行研制的环糊精包合碘具有有效碘含量高、质量稳定和刺激性小等优点。参考《消毒技术规范2002版》的方法，分别以木质桌面、自然水体和鸡舍为消毒对象，验证其临床消毒效果。结果表明，环糊精包合碘1∶ 800倍（W/V）样品稀释液，对木质桌面消毒作用10 min，对物体表面自然菌的平均杀灭对数值为243；1∶ 10 000倍（W/V）投入自然水体，10 min大肠杆菌杀灭率为100%，10～30 min自然菌杀灭率为9965%～100%；1∶ 500倍（W/V）样品稀释液，60 min对鸡舍地面、墙壁自然菌杀灭率为9273%和9358%。
关键词：环糊精包合碘；消毒；自然菌
中图分类号：S857.12+3 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2013）06-0099-03
在畜禽养殖过程中，碘制剂以其消毒效果好、毒副作用低、刺激性小、无残留[1，2]以及无生态毒性等优点而被广泛应用。其中，季铵盐碘和聚维酮碘目前已在临床中广泛使用[3]。但有机络合碘制品有效碘释放率较低、环境消毒成本高，制约了在兽医临床中的推广应用[4]。“环糊精包合碘”是碘单质被β-环糊精包合形成的超分子结构，其有效碘（I）含量高、稳定性好、水溶性强。本试验参考《消毒技术规范2002》进行物体表面消毒、水体消毒和鸡舍消毒试验，验证其消毒效果，为开发新型消毒剂提供有效依据，降低畜禽传染病对养殖业的危害，保障食品安全。1 材料与方法11 试剂与仪器
111 物体表面消毒 消毒剂：环糊精包合碘（有效碘169%）稀释成1∶ 800倍，山东省农业科学院家禽研究所提供。
中和剂：含05%硫代硫酸钠+02%卵磷脂+3%吐温-80的磷酸盐缓冲液。
培养基：胰蛋白胨大豆琼脂培养基。
稀释液：02%吐温-80磷酸盐缓冲液（PBS）。
无菌棉拭子：一次性医用棉签灭菌后备用。
规格板：50 mm × 50 mm无菌不锈钢规格板。
受试对象：山东省实验动物中心微生物准备室木质桌面。
112 水体消毒 消毒剂：环糊精包合碘（有效碘169%），稀释成1∶ 10 000倍，山东省农业科学院家禽研究所提供；以聚维酮碘为对照消毒剂。
中和剂：含05%硫代硫酸钠+02%卵磷脂+3%吐温-80的磷酸盐缓冲液。
自然菌采用营养琼脂培养基，大肠杆菌采用麦康凯培养基。
受试对象：济南郊区自然水样。
113 鸡舍消毒 消毒剂：环糊精包合碘（有效碘169%）稀释成1∶ 500倍，山东省农业科学院家禽研究所提供。
试验动物与条件：200只50日龄育成鸡，鸡舍长×宽×高=3 m × 57 m × 28 m。
培养基：营养琼脂培养基。
无菌棉拭子：一次性医用棉签灭菌后备用。
培养皿：统一采用内径90 mm培养皿。
12 试验方法
121 物体表面消毒 参考《消毒技术规范》（2002年版） 2129，将规格板放于木质桌面，30个区块作为阳性对照区，样本不擦拭消毒液进行采样；30个区块为试验区，将配好的消毒液对木质桌面喷洒至湿润，消毒作用10 min。用棉拭子涂抹法进行采样，统计自然菌落数，计算杀灭对数值。另设阴性对照，即将同批次中和剂、稀释液各取10 ml培养基，检测中和剂和稀释液中是否有自然菌。
杀灭对数值=消毒前菌数对数值-消毒后菌数对数值
122 水体消毒 取9份水样，每份水样1 L，其中4份分别加入01 g的环糊精包合碘，另外4份加入01 g聚维酮碘，1份不加消毒剂，搅拌均匀，记录时间。根据加入消毒剂时间，第1份水样加入环糊精包合碘10 min后加入中和剂，迅速取样，进行原液、1∶ 10、1∶ 100三个浓度进行计数；第2份20 min后加入中和剂，同样方法进行细菌计数，依次类推。聚维酮碘采取相同办法。每个浓度重复2次，计算平均值。不加消毒剂及加入消毒剂后不同时间点进行自然菌和大肠杆菌培养计数。
123 鸡舍消毒 地面消毒先由外向内喷雾1次，喷药量为250 ml/m2，待室内消毒完毕后，再由内向外重复喷雾1次。墙壁消毒喷洒量为100 ml/m2。 于消毒前、消毒30 min、60 min进行采样。空气5个点（墙角12 m处4个点加室中心1个点）、地面3个点（东、中、西）、墙面4个点（12 m处4个墙角）。空气采样参考GB/T 17093-1997采用自然沉降法；墙面和地面采样方法如下：将无菌棉拭子在含 10 ml 稀释液（09%生理盐水）试管中浸湿，于管壁上挤干，对采样区（选定5 cm×5 cm范围）涂抹采样，横竖往返各 8次。采样后，以无菌操作方式将棉拭采样端剪入原稀释液试管内，电动混匀器振荡20 s或在手掌振打200次，做适当稀释后备用。采样后实验室进行自然菌计数，计算单位体积（或面积）的自然菌数。
2 结果与分析
21 物体表面消毒效果
由表1可知，所试环糊精包合碘1∶ 800倍（W/V）样品稀释液，对木质桌面喷洒至湿润，消毒作用10 min，其物体表面自然菌的杀灭对数值
综合分析数据，杀灭对数值基本在平均值附近，考虑菌落计数的实际操作误差，认为本次试验可以证明环糊精包合碘对物体表面消毒有效。22 水体消毒效果
由表2可知， 10 min环糊精包合碘和聚维酮碘对自然菌杀灭率为9965%和9947%，20 min均为9982%，30 min杀灭率则为100%；环糊精包合碘和聚维酮碘均能在10 min内杀灭水体大肠杆菌。环糊精包含碘在效用上与市面流行的产品——聚维酮碘消毒效果相当，但环糊精包合碘为水溶性、成本低，所以推定新型杀毒剂环糊精包合碘水体消毒效果良好。 23 鸡舍消毒效果
由表3可知，30 min地面和墙面自然菌杀灭率为7971%和7775%，60 min杀灭率分别为9273%和9358%。可以看出，30 min时地面自然菌杀灭率较墙面高，可能是由于液体存留地面起到较长时间的消毒效果；60 min时地面自然菌杀灭率反而较低，可能是由于随着时间的推移，地面更易受菌落沉降的影响。同时发现，该新型消毒剂对空气也有一定的杀菌作用，30 min和60 min自然菌杀灭率分别为1767%和1164%，但是杀灭效果不理想。
3 结论与讨论
桌面消毒试验用于鉴定消毒剂对一般物体表面自然菌的杀灭作用，以验证消毒剂的使用剂量。本试验所试环糊精包合碘1∶ 800倍（W/V）样品稀释液，对木质桌面喷洒至湿润，消毒作用10 min，对物体表面自然菌的平均杀灭对数值为243，>10，符合2002年版《消毒技术规范》的要求。熊鸿燕等（1999）[5]采用交联淀粉碘（有效碘含量6393 mg/g）为消毒剂对自来水进行消毒试验， 结果认为5 g/L（有效碘含量为每升水3197 mg）作用5～10 min可杀灭自然菌的9973% ～ 9994%。本试验有效碘含量为每升水169 mg，10 min杀灭率达到9965%，取得了较好的杀菌效果。在鸡舍中使用环糊精包合碘对墙面和地面进行消毒，60 min自然菌杀灭率达到92%以上。同时发现，本消毒剂对空气自然菌具有一定的杀灭作用，但杀灭作用有限；60 min空气中细菌总数反而多于30 min，推测随着时间的延长粪便中的细菌继续扩散至空气中，在下一步试验中需要增加空气喷雾消毒以达到消毒效果。参 考 文 献：
[1] Durani P，Leaper DPovidone-iodine： use in hand disinfection， skin preparation and antiseptic irrigation[J]Int Wound J， 2008，5（3）： 376-87
[2] Mbithi J N， Springthorpe V S， Satta S A rChemical disinfection of hepatitis a virus on environmental surfaces[J]Appl Envir Microbiol， 1990，56： 3601-3604
[3] Elisabeth P， Miranda S， Michaela E， et al Effects of alcohols， povidone-iodine and hydrogen peroxide on biofilms of Staphylococcus epidermidis[J] J Antimicrob Chemother，2007，60： 417-420
[4] Maenthaisong R， Chaiyakunapruk N， Thamlikitkul V Cost- effectiveness analysis of chlorhexidine gluconate compared with povidone-iodine solution for catheter-site care in Siriraj Hospital， Thailand[J] J Med Assoc Thai， Nov， 2006， 89 Suppl 5： S94-101
[5] 熊鸿燕， 张 凌， 刘育京， 等交联淀粉碘的制备及对水中细菌杀灭效果的研究[J]中国消毒学杂志，1999，16（1）：1-6