目的探讨抑制CC类趋化因子配体5（CCL5）基因表达对人乳腺癌细胞增殖能力的影响。方法用特异性CCL5 RNA干扰（RNAi）序列慢病毒载体感染人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231，分别为KD1组和KD2组；另在MCF-7和MDA-MB-251细胞中分设阴性病毒载体感染的阴性对照组（NC1组和NC2组）和未感染组（CON1组和CON2组）。采用实时定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测转染病毒后乳腺癌细胞中CCL5的表达，四甲基偶氮唑蓝（MTF）比色法和流式细胞术（FACS）分析细胞的增殖情况，平板克隆形成实验观察细胞的克隆形成能力。结果CCL5 RNAi慢病毒可显著降低MCF-7和MDA-MB-231细胞中CCL5基因的表达。MTT法检测结果显示，在不同的培养时间，MCF-7和MDA-MB-231细胞的KD组、NC组与CON组细胞培养上清一值差异均无统计学意义（均P〉0．05）。FACS分析结果显示，KD1组、NC1组和CON1组的增殖指数（PI）值分别为0．48±0．03、0．43±0．01和0．45±0．02；KD2组、NC2组和CON2组的PI值分别为0．48±0．02、0．44±0．05和0．47±0．02（两两比较，均P〉0．05）。荧光显微镜下观察显示，KD组的克隆体积及每克隆的细胞数明显小于NC组和CON组。KD1组和KD2组克隆数目（0．34±0．08和0．33±0．10）明显少于NC1组（0．81±0．12）、NC2组（0．97±0．09）、CON1组（0．92±0．12）和CON2组（1．04±0．07），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CCL5基因的表达下调对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞群体倍增时间无明显影响，但可显著降低细胞的克隆形成能力，从而使肿瘤细胞的恶性增殖受到抑制。
抑制CC类趋化因子配体5基因表达对乳腺癌细胞增殖能力的影响
【摘 要】
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目的探讨抑制CC类趋化因子配体5（CCL5）基因表达对人乳腺癌细胞增殖能力的影响。方法用特异性CCL5 RNA干扰（RNAi）序列慢病毒载体感染人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231，分别为KD1组和KD2组；另在MCF-7和MDA-MB-251细胞中分设阴性病毒载体感染的阴性对照组（NC1组和NC2组）和未感染组（CON1组和CON2组）。采用实时定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测
【机 构】
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武汉大学人民医院妇Ⅱ科,430060,武汉大学人民医院普外科,430060,武汉大学人民医院普外科,430060,武汉大学人民医院普外科,430060,武汉大学人民医院普外科,430060
【发表日期】
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2011年33期
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