【摘 要】
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烟草作为一个模式植物在分子生物学研究中发挥着重要的作用,其总RNA的提取是后续分子生物学研究的前提和关键之一。针对过柱型的RNA提取试剂盒在有效的清除烟草中糖类、蛋白
【机 构】
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贵州大学贵州省烟草品质研究重点实验室,
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烟草作为一个模式植物在分子生物学研究中发挥着重要的作用,其总RNA的提取是后续分子生物学研究的前提和关键之一。针对过柱型的RNA提取试剂盒在有效的清除烟草中糖类、蛋白质及次生代谢物的同时,影响了RNA产量和浓度,以及远距离携带液氮取材困难的问题,设置不同提取方法和冰盒不同储运时间处理,对天根RNA simple总RNA提取试剂盒进行了优化,并对冰盒贮存烟叶时间与RNA提取质量的关系进行了探讨。结果表明:优化试剂盒法获得了高浓度高质量的烟草总RNA。经琼脂糖电泳检测,利用该方法提取的烟草总RNA,条带清晰、无拖尾现象,28S与18S的比例约为2∶1。紫外吸收值的测定表明,所提取的烟草总RNA的A260/A280的值在1.8~1.9,浓度显著高于原方法;而冰盒能在5 h内保证所取样品RNA的完整性,适宜于短途运输储存。
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