恶性横纹肌样瘤(MRT)的起源研究——高变异率HeLa细胞致裸鼠产生MRT的实验研究

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HeLa细胞KB株、X株、NM20/X株、H株的染色体众数依次为60±3(超二倍体)、62±3(超二倍体)、68±3(超二倍体和亚四倍体)和78±2(亚四倍体),所占比率分别为72%~76%,69%,52%和40%。在纯化3代的肿瘤阴性对照二倍体猫肾(染色体众数38所占比率80%)和犬肾原代细胞皮下接种裸鼠的致癌/致瘤率分别为0%(0/22)和0%(0/10),X株HeLa细胞冻融裂解物皮下接种裸鼠产生进行性缩小肿瘤的比率为20%(1/5)的前提下,HeLa细胞KB株、X株、NM20/X株皮下接种裸鼠产生进行性生长恶性肿瘤的比率分别为100%(10/ 10),100%(25/25)和100%(5/5),H株细胞皮下接种裸鼠产生恶性肿瘤的比率为50%(5/10)。其中,只有HeLa细胞KB株10~11代(染色体结构畸变率高达20%,出现18%双着丝点和2%断片)以超高数量接种的1组4只裸鼠(0.17ml 12.75×107/鼠)才均形成MRT,特别是从染色体众数不同的3株HeLa细胞中筛选出致瘤性强的X株,连传20代后皮下接种裸鼠形成低分化肿瘤,定名为NM20/X株0代,其染色体众数因经裸鼠体内传代选育而明显增大(染色体众数为68±3,所占比率为52%),实体瘤手术切除后体外连传11代,再皮下接种裸鼠均形成MRT(5/5),但要求完形活细胞接种量要大(5~12×107/鼠),肿瘤产生迅速,生长快速,血管丰富,供血充分,接种细胞后16~22天肿瘤长径×短径均值基本达到30mm×20mm标准。这种MRT在模型动物体内的首次发现,说明宫颈上 皮可能是MRT的起源组织之一,从而为弄清MRT(特别是子宫MRT)的起源问题提供了机会,开辟了组织发生清楚的细胞系用于MRT起源研究的新阶段。本研究结果表明,不同核型细胞的致瘤性不同,肿瘤细胞系高变异率株可在裸鼠体内快速选育成功,染色体结构畸变率特别高可能增加致癌性;HeLa细胞染色体遗传特征决定致瘤性质,细胞染色体数目变异大小和致癌/致瘤性强弱相关,致瘤性由弱到强的顺序依次为KB株,X株和NM20/X株,但H株有例外,尚待进一步实验确定。
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