【摘 要】
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为探究法半夏炮制过程对其毒性成分凝集素蛋白的影响,阐释法半夏炮制解毒的科学内涵,该研究采用Western blot 法半定量分析炮制前后半夏中活性凝集素蛋白的含量;以甘草汁、石
【机 构】
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南京中医药大学药学院,江苏南京210023南京中医药大学药学院,江苏南京210023;江苏省中药炮制重点实验室,江苏南京210023;国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心,江苏南京210023
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为探究法半夏炮制过程对其毒性成分凝集素蛋白的影响,阐释法半夏炮制解毒的科学内涵,该研究采用Western blot 法半定量分析炮制前后半夏中活性凝集素蛋白的含量;以甘草汁、石灰水以及两者混合溶液浸泡的方法分别处理半夏及凝集素蛋白,考察炮制不同时间对毒性蛋白凝集素蛋白含量的影响;采用SDS-PAGE凝胶电泳分析炮制前后溶液及沉淀中凝集素蛋白的条带变化;采用MALDI-TOF技术对炮制前后的蛋白进行相对分子质量定性分析比较.结果 显示,生半夏中含凝集素蛋白5.01％,而法半夏中仅含0.04％,表明炮制后活性凝集素含量显著降低;石灰水浸泡1d、甘草汁浸泡3d后,生品中凝集素含量显著降低,混合溶液浸泡的影响最大.定性分析发现,使用石灰水浸泡后,凝集素蛋白被分解为小分子的肽段,甘草汁浸泡,可促使凝集素蛋白变性沉淀.法半夏炮制过程中辅料甘草汁和石灰水浸泡均可破坏毒性成分凝集素蛋白结构,显著降低毒性成分凝集素蛋白的含量,此为法半夏炮制解毒机制之一.
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