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以广西土鸡为试验材料,利用两步酶解法从出壳后20~30日龄公鸡睾丸中获取生精上皮细胞,以含20%胎牛血清的DMEM为基础培养液,比较了不同浓度DMSO和蔗糖对生精上皮细胞冷冻保存效果的影响。结果表明:DMSO的最佳浓度为10%,添加蔗糖对冻存有害。以10%DMSO为防冻剂,复苏后生精上皮细胞原代混合培养可形成典型的精原干细胞集落,集落呈碱性磷酸酶(AKP)阳性,说明以10%DMSO为防冻剂的冷冻体系适合鸡睾丸生精上皮细胞的冷冻保存。