【摘 要】
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[目的]探究AKIP1对人结直肠癌细胞HCT-116凋亡的影响及其相关分子机制.[方法]设计AKIP1干扰片段siRNA及NC片段,转染至HCT-116细胞,Real-time PCR及Western Blot检测AKIP1 mRN
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院,辽宁 沈阳,110000;金日成综合大学平壤医科大学,朝鲜 平壤,999093
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[目的]探究AKIP1对人结直肠癌细胞HCT-116凋亡的影响及其相关分子机制.[方法]设计AKIP1干扰片段siRNA及NC片段,转染至HCT-116细胞,Real-time PCR及Western Blot检测AKIP1 mRNA及蛋白的表达;通过MTT及流式细胞术检测细胞活力及凋亡情况;通过Real-time PCR检测细胞凋亡相关基因的表达变化,并通过Western Blot检测NF-κB p65在胞浆和胞核中的表达以及凋亡相关蛋白的表达.[结果]转染AKIP1 siRNA后,AKIP1 mRNA及蛋白的表达水平显著下调;MTT实验结果显示AKIP1 siRNA可显著抑制HCT-116细胞的活力;流式细胞术结果表明AKIP1 siRNA可显著促进HCT-116细胞凋亡;同时干扰AKIP1可上调Bax、cleaved-Caspase-3并下调Bcl-2的表达;另外,AKIP1 siRNA可下调细胞核NF-κB p65的表达,上调细胞浆中的NF-κB p65蛋白表达.[结论]AKIP1可能通过活化NF-κB p65抑制HCT-116细胞凋亡进而促进结直肠癌的疾病进展.
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