【摘 要】
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用聚合酶链反应(PCR)从大肠杆菌K12s基因组DNA中扩增大肠杆菌肉碱消旋酶及相关酶基因CaiDE,将其克隆到克隆载体pBluescript SK中,该基因有1500bp,与文献报道相比,有21个核苷
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所,中国科学院上海生物化学研究所
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用聚合酶链反应(PCR)从大肠杆菌K12s基因组DNA中扩增大肠杆菌肉碱消旋酶及相关酶基因CaiDE,将其克隆到克隆载体pBluescript SK中,该基因有1500bp,与文献报道相比,有21个核苷酸不同,相应翻译的氨基酸有11个差异.将该基因重组到corEl为复制子,T7为启动子控制下的表达载体pET-24a(+)中,构建表达质粒pETCaiDE,转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经1mmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后进行SDSPAGE分析,表达蛋白相对分子质量为32000和
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