【摘 要】
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目的提供一种基于显色原理的CYP2C19基因芯片诊断方法。方法采用碱性磷酸酶促显色原理设计制备固定有*2、*3检测探针的CYP2C19基因芯片,通过EDTA抗凝外周血样本提取基因组DNA
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目的提供一种基于显色原理的CYP2C19基因芯片诊断方法。方法采用碱性磷酸酶促显色原理设计制备固定有*2、*3检测探针的CYP2C19基因芯片,通过EDTA抗凝外周血样本提取基因组DNA,PCR扩增CYP2C19*2、*3突变片段并与芯片在43℃杂交,经洗涤、显色后扫描获取图像,经软件分析输出基因型并对基因芯片性能进行系统评价。结果 CYP2C19显色型基因芯片检出限为20 ng基因组DNA;与基因组DNA同等浓度鱼精DNA检测信号阴性;用*2/*2、*1/*3基因型样本重复检测10次,结果一致;常见浓度的甘油三酯、总胆固醇、胆红素和完全溶血对测定没有影响。临床三家医院临检实验室对1000例临床样本的检测与双向测序方法比对验证,结果一致。结论为高通量基因诊断产品的产业化提供了一种实用的技术选择。
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