【摘 要】
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目的 探究间充质干细胞(MSC)在炎症微环境下,通过STAT1-CXCL9-10信号通路发挥免疫抑制作用的机制.方法 分离并培养小鼠骨实质来源MSC,采用流式细胞术结合诱导分化等方法检测M
【机 构】
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天津医科大学总医院儿科,天津 300052;军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所,北京 100850;军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所,北京,100850;天津医科大学总医院儿科,天津,300
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目的 探究间充质干细胞(MSC)在炎症微环境下,通过STAT1-CXCL9-10信号通路发挥免疫抑制作用的机制.方法 分离并培养小鼠骨实质来源MSC,采用流式细胞术结合诱导分化等方法检测MSC自身生物学特性;炎症因子TNF-α、IFN-γ刺激MSC,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测趋化因子CXCL9、CXCL10表达;Western印迹检测STAT1及p-STAT1表达;进一步,RT-PCR检测转染STAT1-siRNA后MSC在炎症因子TNF-α、IFN-γ刺激下STAT1、CXCL9及CXCL10的mRNA表达量;Western印迹检测STAT1及p-STAT1蛋白表达量.结果 分离培养的MSC呈成纤维样,涡旋状贴壁生长,高表达CD29、Sca-1和CD90,不表达或低表达CD11b、CD31、CD34、CD45和MHCⅡ;诱导分化结果显示,细胞出现大量脂滴,碱性磷酸酶活性显著增加;成脂关键转录因子CEBPα和PPARγ、成骨关键转录因子骨钙素和Runx2表达显著增加(P<0.001);炎症因子TNF-α、IFN-γ刺激后MSC中CXCL9、CXCL10、STAT1及p-STAT1表达量均显著增加(P<0.001).采用siRNA敲低MSC中STAT1表达后,在同样的炎症因子刺激下CXCL9、CXCL10、STAT1及p-STAT1表达量均显著降低(P<0.001).结论 MSC在炎症微环境(TNF-α、IFN-γ)中,通过高表达STAT1促使趋化因子CXCL9及CXCL10高表达,进而影响MSC的免疫抑制作用.
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