【摘 要】
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为建立产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens）α毒素（cpa）克隆表达方法,应用PCR方法从羊源D型产气荚膜梭菌中扩增cpa成熟肽基因序列,将其插入pET-28b载体中,构建重组表达载体pET
【机 构】
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石河子大学动物科技学院,新疆畜牧科学院兽医研究所
【基金项目】
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农业公益性行业科研专项（201103008）, 新疆多胎（多羔）肉羊杂交生产体系建设行动计划项目
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为建立产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens）α毒素（cpa）克隆表达方法,应用PCR方法从羊源D型产气荚膜梭菌中扩增cpa成熟肽基因序列,将其插入pET-28b载体中,构建重组表达载体pET-28b-cpa;通过PCR扩增、双酶切和测序方法对重组载体进行鉴定及序列分析,然后转入BL21（DE3）pLysS中诱导表达;用SDS-PAGE检测目的蛋白大小及分布,Western blotting方法检测其反应原性。结果表明,所扩增的cpa基因大小为1110 bp,与GenBank参考序列
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