【摘 要】
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目的构建穿膜肽（PDT）和缺失结合配体结构域的小鼠糖皮质激素受体（GR-ΔLBD）融合基因表达载体,经原核表达、纯化后,进行穿膜特性的鉴定。方法质粒pEGFP-GR-ΔLBD经双酶切,获得目的
【机 构】
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南京军区南京总医院呼吸内科,南京军区联勤部卫生部
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目的构建穿膜肽（PDT）和缺失结合配体结构域的小鼠糖皮质激素受体（GR-ΔLBD）融合基因表达载体,经原核表达、纯化后,进行穿膜特性的鉴定。方法质粒pEGFP-GR-ΔLBD经双酶切,获得目的基因片段GR-ΔLBD,将该基因片段亚克隆入原核表达载体pGEX-PDT,获得pGEX-PDT/GR-ΔLBD融合基因表达载体。将表达载体转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达、谷胱甘肽-琼脂糖树脂处理、谷胱甘肽洗脱液洗脱后,获得PDT/GR-ΔLBD融合蛋白,SDS-PAGE分析融合蛋白;采用荧光素FITC体外标记PDT
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