乙型肝炎肝硬变患者外周血和肝组织中HBV cccDNA的定量检测

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目的:研究乙型肝炎肝硬变患者HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)在肝组织和外周血中的分布及临床应用.方法:选取60例乙型肝炎肝硬变患者肝组织和外周血样本,外周血样本以不降解质粒的ATP依赖的DNA酶(PSAD)进行酶切,肝组织样本以限制性内切酶MluⅠ联合PSAD酶切而后进行荧光定量PCR检测.结果:60例乙型肝炎肝硬变患者外周血HBVcccDNA均阴性,肝组织HBV cccDNA阳性24例(40.00%),在HBeAg(+)组、HBeAg(-)HBeAb(-组、HBeAb(+)组分布分别为66.67%、52.94%和26.47%,定量结果在3组呈递减趋势,且HBeAg(+)组与HBeAb(+)组差异存在统计学意义(P<0.05).肝组织HBV cccDNA占总HBVDNA 0%-7.77%,肝组织HBV cccDNA与肝组织总HBV DNA存在相关性(r=0.53,P<0.01)与外周血总HBV DNA无相关性(r=0.18,P=0.18),与ALT、TBIL均无相关性(r=0.15,P=0.25;r=0.01,P=0.94).结论:乙型肝炎肝硬变患者外周血检测不到HBV cccDNA,肝组织HBV cccDNA占总HBVDNA比例较低,HBeAg(+)患者病毒复制最为活跃.
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