用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIV-1感染

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为了解决窗口期和发病期的HIV-1感染者中,抗体产生不足和(或)由于病毒大量复制中和了血液中的抗体,用检测抗体的常规方法难以确认,这一个困扰临床和防疫工作者的难题,我们建立了用逆转录-聚合酶链反应检测HIV-1感染者血清中病原体的方法.其优点为:(1)敏感性强,检测结果无假阴性反应;(2)扩增HIV-1的gag,pol和env三个基因区的保守基因片段,且每个片段都做巢式扩增,并规定扩增出两个片段才能确认,特异性为100%;(3)所用的引物不仅能检测出中国的HIV-1流行株,也能检出非洲的HIV-1流行株;(4)使用了RNA提取试剂盒,可直接利用筛选试验剩余的血清作标本,标本用量少(200μL),方法相对较简便.
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