【摘 要】
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目的 建立大鼠原代培养肝细胞微粒体睾酮羟化酶系列同工酶(CYP2A1,CYP281/2,CYO2C11,CYP3A1/2)的体外诱导模型. 方法 应用胶原酶原位灌流法分离大鼠肝细胞进行原代培养;用苯
【机 构】
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上海医药工业研究院国家上海新药安全评价研究中心,上海,201203
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目的 建立大鼠原代培养肝细胞微粒体睾酮羟化酶系列同工酶(CYP2A1,CYP281/2,CYO2C11,CYP3A1/2)的体外诱导模型. 方法 应用胶原酶原位灌流法分离大鼠肝细胞进行原代培养;用苯巴比妥钠(PB,1 mmol·L-1)、地塞米松(Dex,10 μmol·L-1)和β-萘酚黄酮(β-NF,50 μmol·L-1)诱导培养肝细胞72 h,提取肝细胞微粒体,进行其肝CYP总量、肝微粒体蛋白含量和睾酮羟化酶比活性的测定.另外采用体内诱导方法,SD大鼠分别给予PB 80 mg·kg-1,Dex 50 mg·kg-1和β-NF 80 mg·kg-1,ip,每天1次,连续5 d,停药24 h后制备肝微粒体进行上述指标的测定. 结果 在体外和体内实验中,PB,Dex和β-NF对肝微粒体蛋白含量、CYP总量和睾酮羟化酶同工酶活性均具有较高的诱导效应.PB对肝CYP总量在体外的诱导效应高于体内,对睾酮不同位置羟化作用的诱导效应体内外无显著性差异;Dex和β-NF对肝CYP总量及睾酮不同位置羟化作用的诱导效应体内外无显著性差异. 结论 大鼠肝睾酮羟化酶体外诱导模型可替代体内实验,用于药物代谢、新药安全性评价及其他外源性化合物代谢和毒性研究.
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