小桐子基因组DNA的提取及ISSR-PCR反应体系的优化

来源 :中国农学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jhxuxu

【摘要】

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为从小桐子嫩叶中提取高质量的基因组DNA,采用改良CTAB法提取的基因组DNA通过OD260/OD280比值测定,琼脂糖凝胶电泳和ISSR-PCR扩增检测,结果表明改良CTAB法提取的DNA纯度高,可

【作者】

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欧文军李开绵王文泉

【机构】

：

中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所,海南大学农学院,中国热带农业科学院热带生物技术研究所

【出处】

：

中国农学通报

【发表日期】

：

2008年5期

【关键词】

：

小桐子 DNA提取 ISSR反应体系正交设计优化 Jstropha curcas Linn DNA extraction ISSR orthogona

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为从小桐子嫩叶中提取高质量的基因组DNA,采用改良CTAB法提取的基因组DNA通过OD260/OD280比值测定,琼脂糖凝胶电泳和ISSR-PCR扩增检测,结果表明改良CTAB法提取的DNA纯度高,可作为ISSR分子标记的模板。同时,采用正交设计的方法,对影响小桐子ISSR-PCR反应体系中的4个因素（引物、Taq DNA Polymerase、10×Buffer（含Mg2＋）、dNTPs）在3个水平上进行优化试验。建立了适合小桐子的既稳定又能扩出最多数量谱带的ISSR最优反应体系,即20μl的

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