蝴蝶兰S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆及低温下的表达分析

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利用RT-PCR和RACE技术从蝴蝶兰品种‘满天红’中克隆获得SAMS基因的c DNA序列,Gen Bank登录号为KP966096。用生物信息学方法预测分析其序列,c DNA全长1 550 bp,含有1个1 194 bp的完整开放阅读框(ORF),编码397个氨基酸,其氨基酸序列与多种植物的SAMS蛋白有很高的相似性。系统进化树分析显示,蝴蝶兰SAMS与油棕的SAMS蛋白亲缘关系较近。采用GAPDH、ACTIN和EF1α这3个不同的内参基因作为标准对蝴蝶兰SAMS基因进行实时荧光定量分析,结果表明,在13℃/8℃的昼夜温度条件下,蝴蝶兰SAMS基因的转录表达在3、6、9和15 d时明显升高,恢复正常温度条件后,该基因的表达下降;在4℃低温条件下,SAMS基因的表达在处理0.5、1、2和4 h内明显升高,处理8 h时其表达开始下降,在处理12、24和48 h时,其表达水平没有明显的升高和下降。结果表明该基因参与了蝴蝶兰低温胁迫的分子调控。
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