探讨CXC趋化因子配体12(CXCL12)及其CXC趋化受体4/7(CXCR4/7)在肝硬化脾亢大鼠模型巨脾组织中的表达及意义。
方法将50只雄性SD纯系大鼠，随机分成模型组(n＝40)和对照组(n＝10)。对照组采用0.9%生理盐水灌胃，剂量为0.3 ml/100 g，每周2次，共8周；模型组则采用40%四氯化碳(CCL4)花生油溶液灌胃，剂量0.3 ml/100 g，每周2次，共8周。经病理学和血常规检查证实制成肝硬化脾亢模型后，用Masson三色染色观察脾脏组织纤维化程度，用免疫组织化学，Western blot和实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)三方法检测脾脏组织中趋化轴CXCL12-CXCR4/CXCR7的表达水平，并与对照组进行比较。
结果Masson三色染色显示：肝硬化脾亢大鼠脾脏纤维面积[(11.17±4.85)%]显著高于对照组[(2.83±0.90)%]，两组比较差异有统计学意义(t＝7.939，P＝0.000)。模型组脾脏指数[(3.14±0.98) mg/g]高于对照组[(2.33±1.03) mg/g]，两者比较差异有统计学意义(t＝2.351，P＝0.025)。免疫组织化学检测：模型组CXCL12、CXCR4及CXCR7的平均吸光度值分别为(8.89±4.89)×10－3、(8.78±4.67)×10－3、(8.47±3.97)×10－3，显著高于对照组(2.89±1.11)×10－3、(2.03±0.45)×10－3、(1.81±0.69)×10－3，差异有统计学意义(t＝4.126，P＝0.001；t＝4.973，P＝0.000；t＝5.644，P＝0.000)；模型组CXCL12、CXCR4及CXCR7阳性细胞率分别为(31.02±9.03)%、(33.22±8.31)%、(28.89±8.40)%，显著高于对照组(20.62±8.88)%、(18.81±6.23)%、(10.49±2.99)%，差异有统计学意义(t＝3.112，P＝0.004；t＝4.170，P＝0.001；t＝6.293，P＝0.000)。Western blot检测：模型组CXCL12、CXCR4及CXCR7蛋白相对表达量分别为1.71±0.98、1.01±0.57、1.15±0.77，显著高于对照组0.39±0.13、0.32±0.11、0.51±0.31，差异有统计学意义(t＝6.366，P＝0.000；t＝5.550，P＝0.000；t＝3.348，P＝0.002)。RT-qPCR检测：模型组CXCL12、CXCR4及CXCR7 mRNA相对表达量分别为3.48±0.90、1.99±0.34、2.53±0.59，显著高于对照组1.05±0.10、1.00±0.18、1.02±0.02，差异有统计学意义(t＝9.607，P＝0.000；t＝10.460，P＝0.000；t＝9.259，P＝0.000)。Pearson相关分析显示：，CXCL12蛋白相对表达量(1.31±1.02)、CXCR4的蛋白相对表达量(0.80±0.57)、CXCR7的蛋白相对表达量(0.96±0.72)与脾脏纤维面积(8.65±5.62)%呈正相关(r＝0.688，P＝0.001；r＝0.711，P＝0.001；r＝0.579，P＝0.009)。CXCL12 mRNA相对表达量(2.74±1.37)、CXCR4 mRNA相对表达量(1.69±0.55)、CXCR7 mRNA相对表达量(2.07±0.87)、与脾脏纤维面积(8.65±5.62)%呈正相关(r＝0.694，P＝0.001；r＝0.647，P＝0.003；r＝0.609，P＝0.006)。
结论CCL4致肝硬化脾亢大鼠巨脾中CXCL12-CXCR4/CXCR7的表达异常增高，且与脾脏纤维面积呈正相关，可能参与了肝硬化脾亢大鼠脾脏纤维化的过程。