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番茄斑萎病毒 (Tomatospottedwiltvirus,TSWV)寄主广泛,危害多种作物,近年发现侵染烟草引起严重经济损失。研究该病毒的分子检测方法,对健康烟草种苗培育和指导病害防控具有重要意义。本文根据TSWV核壳体蛋白基因 (N基因)序列设计引物,用 RTPCR方法对采于云南疑似番茄斑萎病毒症状的5个烟草病害标样 (102,514,自 10,自 16,自 58)进行检测,PCR产物连接 pMD载体并测序。测序结果表明:这 5种烟草病害分离物与已报道 TSWVN基因核酸序列相似性大于 97.04