【摘 要】
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目的改善用流式细胞仪检测BrdU和细胞膜表面抗原同时标记的方法。方法小鼠腹腔注射BrdU100mg/kg,3h后取胸腺制成胸腺单细胞悬液。细胞经CD4、CD8表面抗体标记后,2%多聚甲醛溶
【机 构】
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上海交通大学药学院再生组学课题组,上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室,
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目的改善用流式细胞仪检测BrdU和细胞膜表面抗原同时标记的方法。方法小鼠腹腔注射BrdU100mg/kg,3h后取胸腺制成胸腺单细胞悬液。细胞经CD4、CD8表面抗体标记后,2%多聚甲醛溶液4℃固定过夜,0.1%Triton x-100/0.1%柠檬酸钠/PBS(pH7.2)冰上孵育2min,50U DNaseI37℃孵育30min,BrdU抗体标记,上机检测。结果此方法在细胞表面抗原与BrdU同时检测时,既能够有效的区分BrdU+、BrdU-细胞,同时BrdU抗原标记的处理过程不影响检测细胞表面抗原的检测。结论该方法可用于流式检测BrdU与表面抗原的同时标记,适用于多细胞亚群增殖的检测。
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