【摘 要】
：
目的:基于网络药理学、分子对接技术预测白藜芦醇抗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的分子机制,并根据结果在细颗粒物(PM2.5)染毒的肝细胞模型中进行验证.方法:首先通过中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)、PubChem、DrugBank、SwissTargetPrediction数据库获取白藜芦醇相关靶点,与毒性与基因比较数据库(CTD)、疾病相关的基因与突变位点数据库(DisGeNET)、GeneCards、人类孟德尔遗传病数据库(OMIM)数据库中筛选得到的NAFLD靶点取交集,然后利用ST
【机 构】
：
广东药科大学药学院,广州510006;广东药科大学生命科学与生物制药学院,广州 510006;广州中医药大学基础医学院,广州510006;广东药科大学生命科学与生物制药学院,广州 510006
论文部分内容阅读
目的:基于网络药理学、分子对接技术预测白藜芦醇抗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的分子机制,并根据结果在细颗粒物(PM2.5)染毒的肝细胞模型中进行验证.方法:首先通过中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)、PubChem、DrugBank、SwissTargetPrediction数据库获取白藜芦醇相关靶点,与毒性与基因比较数据库(CTD)、疾病相关的基因与突变位点数据库(DisGeNET)、GeneCards、人类孟德尔遗传病数据库(OMIM)数据库中筛选得到的NAFLD靶点取交集,然后利用STRING 11.5平台构建交集靶点的蛋白互作网络图.根据Cytoscape 3.8.2软件制作靶点-通路图并分析筛选出核心模块及靶点,通过Metascape平台对交集靶点进行基因本体(GO)及京都基因和基因百科全书(KEGG)富集分析,并利用SYBYL-X 2.0软件对白藜芦醇与核心靶点进行分子对接分析.最后采用流式细胞术和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PM2.5染毒人肝细胞系(HepG2)的凋亡变化及凋亡相关蛋白的表达.结果:共获取白藜芦醇与NAFLD交集靶点115个,核心靶点主要包括肿瘤坏死因子(TNF)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和胱天蛋白酶-3(Caspase-3)等.KEGG通路富集分析得174条通路,主要涉及细胞凋亡、TNF等通路.分子对接结果表明白藜芦醇与核心靶点Bcl-2、Caspase-3均有良好结合活性.流式细胞术以及Western blot结果显示白藜芦醇通过影响Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达抑制PM2.5引起的肝细胞凋亡.结论:白藜芦醇抗NAFLD具有多通路、多靶点的特点,通过影响Bcl-2、Caspase-3靶点抑制肝细胞凋亡是其作用的重要途径,为后续研究白藜芦醇抗NAFLD的作用机制提供了理论依据.
其他文献
目的:研究栀子蓝色素的化学结构及其对单胺氧化酶B(MAO-B)的抑制活性,为栀子环烯醚萜类资源性化学成分的合理利用及价值提升寻求潜在可行途径.方法:采用纤维素酶催化水解栀子环烯醚萜苷类化合物得到其苷元,经与氨基酸反应,D101型大孔树脂柱色谱及制备液相色谱分离纯化,获得栀子蓝色素单体,综合运用核磁共振波谱和质谱技术鉴定其结构;以苯甲胺为MAO-B反应底物,与栀子蓝色素单体体外孵育,采用高效液相色谱法检测苯甲胺的代谢产物苯甲醛生成量,以甲醇(A)-50 mmol·L-1磷酸钾缓冲液(B,pH 3.2)(2∶
目的:探讨益气解毒复方含药血清对胸腺增生型重症肌无力(MG)患者胸腺髓质上皮细胞(mTEC)和调节性T细胞(Treg)增殖的影响.方法:采用血清药理学方法,将35只SD大鼠适应性喂养1周后随机分为益气解毒复方低、中、高剂量组,空白组,强的松组,每组7只.大鼠连续灌胃1周,制备上述各组含药血清.利用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法观察不同浓度益气解毒复方含药血清对mTEC和Treg细胞增殖的作用,并通过共同培养方式观察mTEC及益气解毒复方含药血清对Treg细胞增殖的作用.结果:胸腺细胞经培育,使用mTE
目的:探究中药复方祛瘀化痰通脉方对高脂血症金黄地鼠肠道菌群的调节作用及功效配伍的科学性.方法:实验选用叙利亚金黄地鼠,分为正常、模型、复方、祛瘀、化痰和解毒组6组,每组8只.采用高脂饲料喂饲法形成金黄地鼠高脂血症模型,造模4周,灌胃给予祛瘀组(1.11 g·kg-1),化痰组(0.39 g·kg-1),解毒组(0.07 g·kg-1),祛瘀化痰通脉方组(1.42 g·kg-1),正常组与模型组给予等体积的蒸馏水,每天1次,连续灌胃6周.收集血清测定血脂,苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理形态,收集粪便进
目的:通过观察加味柴胡疏肝散及其拆方对高血脂状态心肌缺血合并抑郁症大鼠血管紧张素转化酶2(ACE2)-血管紧张素(Ⅰ-Ⅶ)[Ang(Ⅰ-Ⅶ)]-线粒体组装受体(MasR)轴的影响,探讨其防治心肌缺血合并抑郁症的可能作用机制.方法:108只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,加味柴胡疏肝散组(11.7 g·kg-1),拆方祛瘀化痰组(4.05 g·kg-1),拆方疏肝行气组(3.15 g·kg-1),拆方健脾养血组(4.5 g·kg-1),氟西汀组(0.0018 g·kg-1),曲美他嗪组(0.0054 g
目的:研究化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠肠道菌群的影响,探讨中药调控肠道微生物群进而恢复脑-肠轴平衡的机制.方法:将50只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,化浊解毒活血通络方高(25.0 g·kg-1),中(12.5 g·kg-1),低(6.25 g·kg-1)剂量组,每组10只.参照Longa法并结合既往研究经验制备大脑中动脉梗塞大鼠模型,缺血2 h后再灌注.于脑缺血再灌注损伤72 h检测大鼠神经功能缺损情况、脑梗死范围百分比;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time P
目的:通过网络药理学方法及体内实验研究探讨霍山石斛治疗胃溃疡(GU)的作用机制.方法:从中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库及文献中收集建立霍山石斛的成分库,寻找其主要活性化合物,并通过TCMSP等数据库预测作用靶点.从GeneCards、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、DisGeNET等数据库中筛选GU相关基因,将成分靶点与疾病基因交集后构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析.根据预测结果采用苏木素-伊红
目的:利用便携式近红外光谱技术对川贝母及其掺伪品进行快速鉴别及掺伪量快速检测,以建立系统的川贝母掺伪质量评价体系.方法:采集川贝母样品72批并制作不同类别掺伪品(浙贝母、平贝母、伊贝母、湖北贝母、光慈菇、面粉)570批;利用便携式近红外光谱仪采集样品近红外光谱数据;利用线性判别分析(LDA)及偏最小二乘法(PLS)分别建立川贝母-掺伪品、不同类别掺伪品定性校正模型及不同类别掺伪品掺伪量定量校正模型.结果:川贝母及其掺伪品的定性分析模型对川贝母及其掺伪品的识别率分别为99.49％(校正集),100.00％(
目的:明确牛蒡叶的化学成分;阐明其主要成分的动态积累规律,为牛蒡叶适宜采收期的确定提供依据.方法:采用硅胶,大孔吸附树脂,LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20),十八烷基硅烷键合硅胶(ODS),微孔树脂(MCI)等柱色谱法和高效液相色谱法(HPLC)对牛蒡叶中主要化学成分进行系统分离,结合谱学技术对所分离的成分进行鉴定;采用HPLC-二极管阵列检测器(DAD),Shim-pack GIST C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈(A)-0.3％磷酸水溶液(B
目的:观察归脾汤合血府逐瘀汤加减治疗脑梗死后轻度认知障碍(MCI)心脾两虚,血瘀阻络证的临床疗效及抗炎、抗氧化损伤作用.方法:将114例符合要求患者随机分为对照组和观察组,各57例.对照组,口服红鹿参片,4片/次,2次/d;观察组,口服归脾汤合血府逐瘀汤加减,1剂/d,均连续治疗8周.比较治疗前后蒙特利尔认知评估量表(MoCA),Rivermead行为记忆测验(RBMT),日常生活活动能力(ADL),连线测验-B(TMT-B),神经精神症状问卷(NPI)和中医证候(心脾两虚,血瘀阻络证)评分;检测治疗前后
目的:探讨毛钩藤碱对人宫颈癌Ca Ski细胞增殖、凋亡、转移、侵袭的影响及机制.方法:细胞活性与增殖检测(CCK-8)法检测细胞增殖活性,Hoechst33258染色及流式细胞术检测细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链式反应检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),p53 mRNA表达,划痕实验检测细胞转移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测纤连蛋白(FN),基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量,蛋白免疫