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目的
探讨siRNA沉默细胞周期检测点激酶1(Chk1)基因对宫颈癌HeLa细胞放射敏感性的影响。
方法合成Chk1基因的小分子干扰RNA(si-Chk1),将si-NC或者si-Chk1分别转染到宫颈癌HeLa细胞中,0、2、4、6、8、10 Gy剂量的X射线照射细胞,RT-qPCR和Western blot检测转染后Chk1的mRNA水平和蛋白水平的表达,MTT方法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡,克隆形成实验检测转染后HeLa细胞放射敏感性,Western blot检测转染后P21蛋白和抗凋亡基因Bcl-2蛋白的表达水平。
结果si-Chk1转染到HeLa细胞后,HeLa细胞Chk1基因的mRNA和蛋白表达水平均显著下降(t=2.12~5.86, P<0.05),沉默Chk1的表达抑制了宫颈癌HeLa细胞的增殖(t=3.15~6.36, P<0.05),同时降低宫颈癌HeLa细胞克隆形成能力(t=1.58~6.36, P<0.05),上调P21(t=4.35, P<0.05)、下调Bcl-2蛋白(t=2.37, P<0.05)的表达水平。
结论siRNA沉默Chk1表达能够增强HeLa细胞放射敏感性。