多克隆及单克隆抗体的免疫吸附亲和层析用于人绒毛膜促性腺激素的纯化

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本实验对多克隆抗体和单克隆抗体与Sepharose 4B偶联制成的免疫吸附亲和层析柱对hCG纯化的效果进行了分析。马抗hCG的多克隆抗体和正常兔免疫球蛋白一起偶联到Sapharose 4B上。由这样的免疫吸附剂吸附的hCG,可用4M MgCl2,PH 6.0脱附。不同纯度的hCG起始物经一次纯化后,生物学效价提高的程度是不同的。26iu/mg的hCG-A制品纯化后效价可提高100倍以上;1096 iu/mg的hCG-C制品的效价可提高7倍;6272iu/mg的hCG-D制品经纯化后可达到高纯度hCG制剂的水平(>13000iu/mg)。从聚丙烯酰胺凝胶电泳和高压液相色谱分析,也表明hCG的纯度有不同程度的、明显的提高。但是,免疫学分析表明,不管起始物的纯度是多少,经纯化后所有hCG的制品的免疫学效价均提高到高纯度hCG制剂的水平。单克隆抗体的免疫吸附亲和层析对hCG的纯化具有同样的效果,只是hCG的洗脱条件改成0.2M甘氨酸—HCl缓冲液,PH3。由于单克隆抗体的来源充足,已有可能用免疫吸附亲和层析进行大量hCG的纯化。
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