目的采用HPLC法测定人脑脊液中万古霉素和去甲万古霉素的含量。方法采用Diamonsil C18柱(150 mm×46 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(p H3)(20∶80),流速1.0 m L·min-1,柱温30℃,检测波长236 nm,万古霉素和去甲万古霉素互为内标。结果脑脊液中万古霉素和去甲万古霉素的线性范围分别为0.0977~97.68(r2=0.9995)、0.104~104μg·m L-1(r2=0.9996),检测限分别为0.0484、0.0524μg·m L-1;方法回收率分别为99.8%~109.0%、99.6~107.0%,绝对回收率为95.6%~100.0%、95.9%~99.6%,批内、批间RSD均≤4.0%;室温下放置8 h、冻融循环3次和冰冻21 d的稳定性均良好。结论所用方法简便准确,适宜于临床脑脊液中万古霉素和去甲万古霉素的分析。