人白介素-7重组蛋白的原核表达、纯化及活性测定

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目的:构建重组质粒p ET32a-h IL-7,诱导表达,纯化并鉴定目的蛋白。方法:将人白介素-7基因克隆到原核表达载体p ET32a(+)上,得到重组质粒p ET32a-h IL-7,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导得到融合蛋白Trx-h IL-7。融合蛋白主要以包涵体形式存在。包涵体通过复性、酶切、纯化等步骤处理。利用Western blot鉴定重组蛋白,对其生物学活性用其依赖性细胞株2E8增殖实验测定。结果:成功构建重组质粒p ET32a-h IL-7。包涵体通过透析复性,肠激酶切,镍
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