【摘 要】
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目的 检测大鼠骨髓中是否存在肝脏干细胞,并用肝损伤血清和肝细胞生长因子(HGF)刺激骨髓细胞向肝细胞转化. 方法 SD大鼠骨髓单个核细胞分3组进行培养:(1)单纯培养基对照组;(2)肝损伤血清组(15%, 血清来自于2-AAF+75%肝切除大鼠);(3)HGF(20ng/ml)组.用甲胎蛋白(AFP)和白蛋白作为细胞标志, 用免疫组织化学、逆转录-聚合酶链反应(PCR)、巢式PCR和western
【机 构】
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450003,郑州,郑州大学消化疾病研究所、郑州大学第二附属医院消化内科,450003,郑州,郑州大学消化疾病研究所、郑州大学第二附属医院消化内科,450003,郑州,郑州大学消化疾病研究所、郑州大学
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目的 检测大鼠骨髓中是否存在肝脏干细胞,并用肝损伤血清和肝细胞生长因子(HGF)刺激骨髓细胞向肝细胞转化. 方法 SD大鼠骨髓单个核细胞分3组进行培养:(1)单纯培养基对照组;(2)肝损伤血清组(15%, 血清来自于2-AAF+75%肝切除大鼠);(3)HGF(20ng/ml)组.用甲胎蛋白(AFP)和白蛋白作为细胞标志, 用免疫组织化学、逆转录-聚合酶链反应(PCR)、巢式PCR和western blot方法,观察大鼠肝损伤血清和HGF对骨髓细胞转化的促进作用. 结果肝损伤血清组和HGF组培养后10d和20d AFP免疫组织化学和western blot染色阳性; RT-PCR AFP mRNA阳性, 新鲜骨髓细胞和单纯IMDM/F12培养基组AFP蛋白和mRNA均阴性.新鲜骨髓细胞存在白蛋白mRNA表达, 在肝损伤血清组和HGF组培养后10d和20d, 白蛋白mRNA表达增强. 结论大鼠肝损伤血清和HGF可促使体外培养骨髓细胞表达AFP mRNA和AFP.骨髓中可能存在骨髓源性肝干细胞,并微弱表达白蛋白mRNA; 肝损伤血清和HGF可以促进骨髓细胞表达白蛋白mRNA。
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