几株球形芽孢杆菌二元毒素基因的检测及对敏感和抗性尖音库蚊的毒性

来源 :昆虫学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jematrix
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根据Bacillussphaericus2362二元毒素基因核着酸序列合成的一组寡聚核苷酸为引物,通过PCR扩增出1.1kb的DNA片段作探针检测了C3-41、IAB881、IAB872、BS-197和LP1-G菌株中二元毒素基因。Southern杂交表明C3-41、IAB881、IAB872和BS-197菌株中3·5kbHindⅢ及LP1-G中4.7kbHindⅢ的酶切片段分别带有与探针有高度同源性的二元毒素基因。SDS-PAGE和Western印迹杂交表明所有菌株都能产生41.9kD和51.4kD的毒素蛋白。C3-41、IAB881、BS-197和2362的全发酵液和碱抽提液对敏感尖音库蚊Culexpipienssubsp.pipiens幼虫毒性高,但对抗性幼虫几乎无毒;LP1-G对敏感和抗性蚊幼虫具有相同的中度毒杀作用;IAB872对敏感幼虫毒性高,对抗性幼虫的毒力同LP1-G相似。这两株菌对抗性蚊幼虫的毒性可能是由Mtx毒素蛋白所导致的。 A group of oligonucleotides synthesized based on the nucleotide sequence of Bacilluphaphaphaerusus2362 binary toxin gene were used as primers to amplify the 1.1kb DNA fragment as a probe to detect C3-41, IAB881, IAB872, BS-197 and Binary toxin genes in LP1-G strains. Southern hybridization showed that the 4.7 kb HindIII digested fragments of 3.5 kb Hind III and LP1-G in C3-41, IAB881, IAB872 and BS-197 strains, respectively, carry the binary toxin gene with high homology to the probe. Hybridization by SDS-PAGE and Western blotting indicated that all strains produced 41.9 kD and 51.4 kD of toxin protein. C3-41, IAB881, BS-197 and 2362 of the whole fermentation broth and alkali extract of Culex pipienssubsp. The pipiens larvae are highly toxic, but almost nontoxic to the confronting larvae; LP1-G has the same moderate toxin killing effect on susceptible and resistant mosquito larvae; IAB872 is highly toxic to susceptible larvae and the virulence of the antagonistic larvae is similar to LP1-G . The toxicity of these two strains to mosquito-resistant mosquito larvae may be caused by the Mtx toxin protein.
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