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摘 要:本文通过对大量文献的总结,对金银花的分布、药用价值及化学成分作了详细的阐述;对金银花的有效成分绿原酸作了介绍,并对绿原酸的提取、分离、纯化方法作了描述和对比,为工业上绿原酸的制备提供了参考。
关键词:金银花 提取工艺 绿原酸 药用价值
金银花为忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb)、红腺忍冬(Lonicera Lypoglauca Miq)、山银花(Lonicera confusa DC)或毛花柱忍冬(Lonicera dasystyla Rehd)的干燥花蕾或带初开的花。全世界忍冬植物大约200种,我国有98种,分布于全国各地,其中供药用的达47种。金银花为中医常用药,其味甘、寒,归肺、心、胃经,具有清热解毒、凉散风热之功效,主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症,应用历史悠久。
1 理化成分
1.1 挥发油:挥发油是金银花的有效成分之一[1]。目前在金银花挥发油中鉴定出的化学成分多达近70种。主要含芳樟醇、棕榈酸,其他化学成分为醇、醛、酯、酮、烷、烯、炔等有机化合物。
1.2 有机酸类:绿原酸类化合物也是金银花有效成分之一。包括绿原酸(Chlorogenic acid) 和异绿原酸(isochlorogenic acid)[2],其他有机酸还有咖啡酸(coffeic acid)和棕榈酸(Palmitic acid)。
1.3 黄酮类化合物:1949年冲七太郎首先从金银花中分离出木犀草素(luteolin),后又得忍冬苷(lonicerin),1995年高玉敏等首次从金银花中分离出四个黄酮类化合物;1996年黄丽瑛等[3]首次分离出corymbosin和5-羟-3’-4’-7-三甲基黄酮(5-hydroxy-3’-4’-7-t rimethoxy flavone) 。
1.4 三萜类:娄红祥等从金银花水溶性部分中分离得到3种具有保肝活性的三萜皂苷[4];陈昌祥从金银花花蕾中分离得到了6个化合物,其中有一新化合物,命名为新长春皂苷F[5]。
1.5 无机元素:金银花含微量元素共有15种:Fe,Mn,Cu,Zn,Sr,Ti,Mo,Ba,Ni,Cr,Pb,V,Co,Li,Ca[6]。
1.6 醇类:金银花中鉴定出的醇类主要包括:β-谷甾醇,肌醇,二十九烷醇等[7]。
2 金银花的有效成分——绿原酸
金银花的主要有效成分之一为绿原酸。绿原酸是咖啡酸与奎宁酸(1-羟基六氢没食子酸)的酯,分子中具有羧基、酯键以及多元醇和多酚结构,是一种苯丙素类化合物,化学名为3-O-咖啡酰奎宁酸,结构式如图1所示。
绿原酸的药用历史悠久,具有抗菌、抗病毒等作用,对消化、血液系统和生殖系统疾病均有疗效。近年,绿原酸及其衍生物被确认是大鼠肝微粒体中葡萄糖-6-磷酸位移酶的特效性抑制剂,显示出其在治疗糖尿病方面的良好前景。绿原酸也是某些中药制剂质量控制的重要指标[8]。
3 绿原酸的提取工艺
正是由于绿原酸良好的药用价值以及良好的应用前景,国内外已有不少文献[9]对金银花中绿原酸的分析、测定及提取工艺的研究,但提取方法各不相同。主要流程大致可以分为粗提、分离纯化、成品的制备等步骤,其中粗提方法很多。
3.1 绿原酸的提取方法
3.1.1 回流提取法:称取原料适量,在一定pH值和温度下,加入定量的提取溶剂,回流提取,过滤、滤渣,再用相同的提取溶剂在相同的条件下提取、过滤,将滤液合并并进行真空干燥至粉末。
3.1.2 超声提取法:称取原料适量,在一定pH值和温度下,加入定量的提取溶剂,超声波处理,过滤、滤渣,再用相同的提取溶剂在相同的条件下处理、过滤,将滤液合并并进行真空干燥至粉末。
3.1.3 微波提取法:称取原料适量,在一定pH值和温度下,加入定量的提取溶剂,置微波炉中处理一定的时间,取出冷却,再置微波炉中同样条件处理,如此重复6次,过滤,真空干燥至粉末。
3.1.4 渗漉法提取:称取原料适量,在一定pH值和温度下,加入定量的提取溶剂,置冰箱冷却,待结冰后取出,冰融化后装入渗漉筒,收集渗漉液真空干燥至粉末。
3.1.5 煎煮法提取:称取原料适量,加入适量80%工业乙醇(pH值为2.5),煎煮一定的时间,过滤、滤渣,再用同样的方法煎煮相同时间,过滤,合并滤液真空干燥至粉末。
3.1.6 浸提法提取:称取原料适量,加入适量80%工业乙醇(pH值为2.5),室温静置24h,过滤,滤液真空干燥至粉末。
4 绿原酸的分离、纯化工艺
将提取液过滤,浓缩,拌入聚酰胺,真空烘干,研磨,过筛,得粗品,经聚酰胺柱层析分离,得产品得率和产品纯度(绿原酸含量)。另外可以绿原酸含量为指标,分别考察聚酰胺目数、洗脱剂、物料比、柱径与柱长比、流速、洗脱剂用量等影响因素,优化出最佳的分离工艺参数。对分离后的产品,选用不同的溶剂进行重结晶,从中选出最佳的溶剂进行精制,得到绿原酸精品。当然,分离纯化还有很多方法,比如利用大孔树脂也同样可以纯化绿原酸。
5 绿原酸的含量测定
精确称取原料1.00g,加入30mL95%乙醇溶液,置于索氏提取器中回流提取,55℃回流提取4h,放置冷却至室温,过滤,定容至50 mL,摇匀,精确吸取提取液0.1 mL,稀释至4 mL,以95 %乙醇作对空白,在紫外分光光度计331 nm处测定吸光度A值,按绿原酸的标准曲线计算其绿原酸的含量。
6 绿原酸的提取工艺对比
6.1 提取溶剂的选取:提取溶剂主要有两种,即水和乙醇(工业乙醇),不同的提取方法可以采用不同的提取溶剂。乙醇的提取效果明显好于水,但水作为溶剂,虽然提取率相对较低,但对环境无污染,生产成本相对较低,工业生产切实可行,所以目前仍然是大工业生产普遍采用的提取方法。
6.2 提取方法的选取:采用相同的溶剂、不同的提取方法对绿原酸进行提取,提取率最高的方法为超声波法,其次为煎煮法、微波法、浸提法等[9]。
参考文献:
[1]张玲.山东金银花干花及鲜花挥发油成分研究.西北药学杂志,1998,13(6):249-250.
[2]刘祥兰,刘重芳,张英等.金银花中绿原酸提取工艺的比较和优化研究.中成药,2000,22(6):402.
[3]黄丽瑛.中药金银花化学成分的研究.中草药,1996,27(11):645-647.
[4]娄红祥,郎伟君,吕木坚.金银花水溶性化合物的分离与结构确定.中草药,1996,27(4):195.
[5]陈昌祥,王薇薇,倪伟等.金银花花蕾中三萜皂甙.云南植物研究,2000,22(2):201-208.
[6]吴二喜.忍冬与灰毡毛忍冬微量元素的分析.中草药,1998,19(6):45-47.
[7]李永梅,王天志,王志霄.细毡毛忍冬花蕾化学成分研究.中国中药杂志,2001,26(1):45-47.
[8]符史良,钟杰平,李海霞等.从金银花中提取绿原酸的工艺研究.广东海洋大学学报,2007,27(4):70-73.
[9]邓素兰,余继宏,邓芳琴.金银花中绿原酸提取工艺的对比.吉首大学学报(自然科学版),2007,28(2):109-112.
关键词:金银花 提取工艺 绿原酸 药用价值
金银花为忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb)、红腺忍冬(Lonicera Lypoglauca Miq)、山银花(Lonicera confusa DC)或毛花柱忍冬(Lonicera dasystyla Rehd)的干燥花蕾或带初开的花。全世界忍冬植物大约200种,我国有98种,分布于全国各地,其中供药用的达47种。金银花为中医常用药,其味甘、寒,归肺、心、胃经,具有清热解毒、凉散风热之功效,主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症,应用历史悠久。
1 理化成分
1.1 挥发油:挥发油是金银花的有效成分之一[1]。目前在金银花挥发油中鉴定出的化学成分多达近70种。主要含芳樟醇、棕榈酸,其他化学成分为醇、醛、酯、酮、烷、烯、炔等有机化合物。
1.2 有机酸类:绿原酸类化合物也是金银花有效成分之一。包括绿原酸(Chlorogenic acid) 和异绿原酸(isochlorogenic acid)[2],其他有机酸还有咖啡酸(coffeic acid)和棕榈酸(Palmitic acid)。
1.3 黄酮类化合物:1949年冲七太郎首先从金银花中分离出木犀草素(luteolin),后又得忍冬苷(lonicerin),1995年高玉敏等首次从金银花中分离出四个黄酮类化合物;1996年黄丽瑛等[3]首次分离出corymbosin和5-羟-3’-4’-7-三甲基黄酮(5-hydroxy-3’-4’-7-t rimethoxy flavone) 。
1.4 三萜类:娄红祥等从金银花水溶性部分中分离得到3种具有保肝活性的三萜皂苷[4];陈昌祥从金银花花蕾中分离得到了6个化合物,其中有一新化合物,命名为新长春皂苷F[5]。
1.5 无机元素:金银花含微量元素共有15种:Fe,Mn,Cu,Zn,Sr,Ti,Mo,Ba,Ni,Cr,Pb,V,Co,Li,Ca[6]。
1.6 醇类:金银花中鉴定出的醇类主要包括:β-谷甾醇,肌醇,二十九烷醇等[7]。
2 金银花的有效成分——绿原酸
金银花的主要有效成分之一为绿原酸。绿原酸是咖啡酸与奎宁酸(1-羟基六氢没食子酸)的酯,分子中具有羧基、酯键以及多元醇和多酚结构,是一种苯丙素类化合物,化学名为3-O-咖啡酰奎宁酸,结构式如图1所示。
![](http://img.resource.qikan.cn/qkimages/wjlt/wjlt200820/wjlt200820184-1-l.jpg)
绿原酸的药用历史悠久,具有抗菌、抗病毒等作用,对消化、血液系统和生殖系统疾病均有疗效。近年,绿原酸及其衍生物被确认是大鼠肝微粒体中葡萄糖-6-磷酸位移酶的特效性抑制剂,显示出其在治疗糖尿病方面的良好前景。绿原酸也是某些中药制剂质量控制的重要指标[8]。
3 绿原酸的提取工艺
正是由于绿原酸良好的药用价值以及良好的应用前景,国内外已有不少文献[9]对金银花中绿原酸的分析、测定及提取工艺的研究,但提取方法各不相同。主要流程大致可以分为粗提、分离纯化、成品的制备等步骤,其中粗提方法很多。
3.1 绿原酸的提取方法
3.1.1 回流提取法:称取原料适量,在一定pH值和温度下,加入定量的提取溶剂,回流提取,过滤、滤渣,再用相同的提取溶剂在相同的条件下提取、过滤,将滤液合并并进行真空干燥至粉末。
3.1.2 超声提取法:称取原料适量,在一定pH值和温度下,加入定量的提取溶剂,超声波处理,过滤、滤渣,再用相同的提取溶剂在相同的条件下处理、过滤,将滤液合并并进行真空干燥至粉末。
3.1.3 微波提取法:称取原料适量,在一定pH值和温度下,加入定量的提取溶剂,置微波炉中处理一定的时间,取出冷却,再置微波炉中同样条件处理,如此重复6次,过滤,真空干燥至粉末。
3.1.4 渗漉法提取:称取原料适量,在一定pH值和温度下,加入定量的提取溶剂,置冰箱冷却,待结冰后取出,冰融化后装入渗漉筒,收集渗漉液真空干燥至粉末。
3.1.5 煎煮法提取:称取原料适量,加入适量80%工业乙醇(pH值为2.5),煎煮一定的时间,过滤、滤渣,再用同样的方法煎煮相同时间,过滤,合并滤液真空干燥至粉末。
3.1.6 浸提法提取:称取原料适量,加入适量80%工业乙醇(pH值为2.5),室温静置24h,过滤,滤液真空干燥至粉末。
4 绿原酸的分离、纯化工艺
将提取液过滤,浓缩,拌入聚酰胺,真空烘干,研磨,过筛,得粗品,经聚酰胺柱层析分离,得产品得率和产品纯度(绿原酸含量)。另外可以绿原酸含量为指标,分别考察聚酰胺目数、洗脱剂、物料比、柱径与柱长比、流速、洗脱剂用量等影响因素,优化出最佳的分离工艺参数。对分离后的产品,选用不同的溶剂进行重结晶,从中选出最佳的溶剂进行精制,得到绿原酸精品。当然,分离纯化还有很多方法,比如利用大孔树脂也同样可以纯化绿原酸。
5 绿原酸的含量测定
精确称取原料1.00g,加入30mL95%乙醇溶液,置于索氏提取器中回流提取,55℃回流提取4h,放置冷却至室温,过滤,定容至50 mL,摇匀,精确吸取提取液0.1 mL,稀释至4 mL,以95 %乙醇作对空白,在紫外分光光度计331 nm处测定吸光度A值,按绿原酸的标准曲线计算其绿原酸的含量。
6 绿原酸的提取工艺对比
6.1 提取溶剂的选取:提取溶剂主要有两种,即水和乙醇(工业乙醇),不同的提取方法可以采用不同的提取溶剂。乙醇的提取效果明显好于水,但水作为溶剂,虽然提取率相对较低,但对环境无污染,生产成本相对较低,工业生产切实可行,所以目前仍然是大工业生产普遍采用的提取方法。
6.2 提取方法的选取:采用相同的溶剂、不同的提取方法对绿原酸进行提取,提取率最高的方法为超声波法,其次为煎煮法、微波法、浸提法等[9]。
参考文献:
[1]张玲.山东金银花干花及鲜花挥发油成分研究.西北药学杂志,1998,13(6):249-250.
[2]刘祥兰,刘重芳,张英等.金银花中绿原酸提取工艺的比较和优化研究.中成药,2000,22(6):402.
[3]黄丽瑛.中药金银花化学成分的研究.中草药,1996,27(11):645-647.
[4]娄红祥,郎伟君,吕木坚.金银花水溶性化合物的分离与结构确定.中草药,1996,27(4):195.
[5]陈昌祥,王薇薇,倪伟等.金银花花蕾中三萜皂甙.云南植物研究,2000,22(2):201-208.
[6]吴二喜.忍冬与灰毡毛忍冬微量元素的分析.中草药,1998,19(6):45-47.
[7]李永梅,王天志,王志霄.细毡毛忍冬花蕾化学成分研究.中国中药杂志,2001,26(1):45-47.
[8]符史良,钟杰平,李海霞等.从金银花中提取绿原酸的工艺研究.广东海洋大学学报,2007,27(4):70-73.
[9]邓素兰,余继宏,邓芳琴.金银花中绿原酸提取工艺的对比.吉首大学学报(自然科学版),2007,28(2):109-112.