论文部分内容阅读
摘 要：本文通过对大量文献的总结，对金银花的分布、药用价值及化学成分作了详细的阐述；对金银花的有效成分绿原酸作了介绍，并对绿原酸的提取、分离、纯化方法作了描述和对比，为工业上绿原酸的制备提供了参考。
关键词：金银花 提取工艺 绿原酸 药用价值
金银花为忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb)、红腺忍冬(Lonicera Lypoglauca Miq)、山银花(Lonicera confusa DC)或毛花柱忍冬(Lonicera dasystyla Rehd)的干燥花蕾或带初开的花。全世界忍冬植物大约200种，我国有98种，分布于全国各地，其中供药用的达47种。金银花为中医常用药，其味甘、寒，归肺、心、胃经，具有清热解毒、凉散风热之功效，主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症，应用历史悠久。
1 理化成分
1.1 挥发油：挥发油是金银花的有效成分之一［１］。目前在金银花挥发油中鉴定出的化学成分多达近70种。主要含芳樟醇、棕榈酸，其他化学成分为醇、醛、酯、酮、烷、烯、炔等有机化合物。
1.2 有机酸类：绿原酸类化合物也是金银花有效成分之一。包括绿原酸(Chlorogenic acid) 和异绿原酸(isochlorogenic acid)［２］，其他有机酸还有咖啡酸(coffeic acid)和棕榈酸(Palmitic acid)。
1.3 黄酮类化合物：1949年冲七太郎首先从金银花中分离出木犀草素(luteolin)，后又得忍冬苷(lonicerin)，1995年高玉敏等首次从金银花中分离出四个黄酮类化合物；1996年黄丽瑛等［３］首次分离出corymbosin和5-羟-3’-4’-7-三甲基黄酮(5-hydroxy-3’-4’-7-t rimethoxy flavone) 。
1.4 三萜类：娄红祥等从金银花水溶性部分中分离得到3种具有保肝活性的三萜皂苷［４］；陈昌祥从金银花花蕾中分离得到了6个化合物，其中有一新化合物，命名为新长春皂苷F［５］。
1.5 无机元素：金银花含微量元素共有15种：Fe，Mn，Cu，Zn，Sr，Ti，Mo，Ba，Ni，Cr，Pb，V，Co，Li，Ca［６］。
1.6 醇类：金银花中鉴定出的醇类主要包括：β-谷甾醇，肌醇，二十九烷醇等［７］。
2 金银花的有效成分——绿原酸
金银花的主要有效成分之一为绿原酸。绿原酸是咖啡酸与奎宁酸（1－羟基六氢没食子酸）的酯，分子中具有羧基、酯键以及多元醇和多酚结构，是一种苯丙素类化合物，化学名为3-O-咖啡酰奎宁酸，结构式如图1所示。
绿原酸的药用历史悠久，具有抗菌、抗病毒等作用，对消化、血液系统和生殖系统疾病均有疗效。近年，绿原酸及其衍生物被确认是大鼠肝微粒体中葡萄糖-6-磷酸位移酶的特效性抑制剂，显示出其在治疗糖尿病方面的良好前景。绿原酸也是某些中药制剂质量控制的重要指标［８］。
3 绿原酸的提取工艺
正是由于绿原酸良好的药用价值以及良好的应用前景，国内外已有不少文献［９］对金银花中绿原酸的分析、测定及提取工艺的研究，但提取方法各不相同。主要流程大致可以分为粗提、分离纯化、成品的制备等步骤，其中粗提方法很多。
3.1 绿原酸的提取方法
3.1.1 回流提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，回流提取，过滤、滤渣，再用相同的提取溶剂在相同的条件下提取、过滤，将滤液合并并进行真空干燥至粉末。
3.1.2 超声提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，超声波处理，过滤、滤渣，再用相同的提取溶剂在相同的条件下处理、过滤，将滤液合并并进行真空干燥至粉末。
3.1.3 微波提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，置微波炉中处理一定的时间，取出冷却，再置微波炉中同样条件处理，如此重复6次，过滤，真空干燥至粉末。
3.1.4 渗漉法提取：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，置冰箱冷却，待结冰后取出，冰融化后装入渗漉筒，收集渗漉液真空干燥至粉末。
3.1.5 煎煮法提取：称取原料适量，加入适量80%工业乙醇(pH值为2.5)，煎煮一定的时间，过滤、滤渣，再用同样的方法煎煮相同时间，过滤，合并滤液真空干燥至粉末。
3.1.6 浸提法提取：称取原料适量，加入适量80%工业乙醇(pH值为2.5)，室温静置24h，过滤，滤液真空干燥至粉末。
4 绿原酸的分离、纯化工艺
将提取液过滤，浓缩，拌入聚酰胺，真空烘干，研磨，过筛，得粗品，经聚酰胺柱层析分离，得产品得率和产品纯度(绿原酸含量)。另外可以绿原酸含量为指标，分别考察聚酰胺目数、洗脱剂、物料比、柱径与柱长比、流速、洗脱剂用量等影响因素，优化出最佳的分离工艺参数。对分离后的产品，选用不同的溶剂进行重结晶，从中选出最佳的溶剂进行精制，得到绿原酸精品。当然，分离纯化还有很多方法，比如利用大孔树脂也同样可以纯化绿原酸。
5 绿原酸的含量测定
精确称取原料1.00g，加入30mL95%乙醇溶液，置于索氏提取器中回流提取，55℃回流提取4h，放置冷却至室温，过滤，定容至50 mL，摇匀，精确吸取提取液0.1 mL，稀释至4 mL，以95 %乙醇作对空白，在紫外分光光度计331 nm处测定吸光度A值，按绿原酸的标准曲线计算其绿原酸的含量。
6 绿原酸的提取工艺对比
6.1 提取溶剂的选取：提取溶剂主要有两种，即水和乙醇（工业乙醇），不同的提取方法可以采用不同的提取溶剂。乙醇的提取效果明显好于水，但水作为溶剂，虽然提取率相对较低，但对环境无污染，生产成本相对较低，工业生产切实可行，所以目前仍然是大工业生产普遍采用的提取方法。
6.2 提取方法的选取：采用相同的溶剂、不同的提取方法对绿原酸进行提取，提取率最高的方法为超声波法，其次为煎煮法、微波法、浸提法等［９］。
参考文献：
［1］张玲.山东金银花干花及鲜花挥发油成分研究.西北药学杂志，1998，13(6)：249-250.
［2］刘祥兰，刘重芳，张英等.金银花中绿原酸提取工艺的比较和优化研究.中成药，2000，22(6)：402.
［3］黄丽瑛.中药金银花化学成分的研究.中草药，1996，27(11)：645-647.
［4］娄红祥，郎伟君，吕木坚.金银花水溶性化合物的分离与结构确定.中草药，1996，27(4)：195.
［5］陈昌祥，王薇薇，倪伟等.金银花花蕾中三萜皂甙.云南植物研究，2000，22(2)：201-208.
［6］吴二喜.忍冬与灰毡毛忍冬微量元素的分析.中草药，1998，19(6)：45-47.
［7］李永梅，王天志，王志霄.细毡毛忍冬花蕾化学成分研究.中国中药杂志，2001，26(1)：45-47.
［8］符史良，钟杰平，李海霞等.从金银花中提取绿原酸的工艺研究.广东海洋大学学报，2007，27(4)：70-73.
［9］邓素兰，余继宏，邓芳琴.金银花中绿原酸提取工艺的对比.吉首大学学报(自然科学版)，2007，28(2)：109-112.
关键词：金银花 提取工艺 绿原酸 药用价值
金银花为忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb)、红腺忍冬(Lonicera Lypoglauca Miq)、山银花(Lonicera confusa DC)或毛花柱忍冬(Lonicera dasystyla Rehd)的干燥花蕾或带初开的花。全世界忍冬植物大约200种，我国有98种，分布于全国各地，其中供药用的达47种。金银花为中医常用药，其味甘、寒，归肺、心、胃经，具有清热解毒、凉散风热之功效，主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症，应用历史悠久。
1 理化成分
1.1 挥发油：挥发油是金银花的有效成分之一［１］。目前在金银花挥发油中鉴定出的化学成分多达近70种。主要含芳樟醇、棕榈酸，其他化学成分为醇、醛、酯、酮、烷、烯、炔等有机化合物。
1.2 有机酸类：绿原酸类化合物也是金银花有效成分之一。包括绿原酸(Chlorogenic acid) 和异绿原酸(isochlorogenic acid)［２］，其他有机酸还有咖啡酸(coffeic acid)和棕榈酸(Palmitic acid)。
1.3 黄酮类化合物：1949年冲七太郎首先从金银花中分离出木犀草素(luteolin)，后又得忍冬苷(lonicerin)，1995年高玉敏等首次从金银花中分离出四个黄酮类化合物；1996年黄丽瑛等［３］首次分离出corymbosin和5-羟-3’-4’-7-三甲基黄酮(5-hydroxy-3’-4’-7-t rimethoxy flavone) 。
1.4 三萜类：娄红祥等从金银花水溶性部分中分离得到3种具有保肝活性的三萜皂苷［４］；陈昌祥从金银花花蕾中分离得到了6个化合物，其中有一新化合物，命名为新长春皂苷F［５］。
1.5 无机元素：金银花含微量元素共有15种：Fe，Mn，Cu，Zn，Sr，Ti，Mo，Ba，Ni，Cr，Pb，V，Co，Li，Ca［６］。
1.6 醇类：金银花中鉴定出的醇类主要包括：β-谷甾醇，肌醇，二十九烷醇等［７］。
2 金银花的有效成分——绿原酸
金银花的主要有效成分之一为绿原酸。绿原酸是咖啡酸与奎宁酸（1－羟基六氢没食子酸）的酯，分子中具有羧基、酯键以及多元醇和多酚结构，是一种苯丙素类化合物，化学名为3-O-咖啡酰奎宁酸，结构式如图1所示。
绿原酸的药用历史悠久，具有抗菌、抗病毒等作用，对消化、血液系统和生殖系统疾病均有疗效。近年，绿原酸及其衍生物被确认是大鼠肝微粒体中葡萄糖-6-磷酸位移酶的特效性抑制剂，显示出其在治疗糖尿病方面的良好前景。绿原酸也是某些中药制剂质量控制的重要指标［８］。
3 绿原酸的提取工艺
正是由于绿原酸良好的药用价值以及良好的应用前景，国内外已有不少文献［９］对金银花中绿原酸的分析、测定及提取工艺的研究，但提取方法各不相同。主要流程大致可以分为粗提、分离纯化、成品的制备等步骤，其中粗提方法很多。
3.1 绿原酸的提取方法
3.1.1 回流提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，回流提取，过滤、滤渣，再用相同的提取溶剂在相同的条件下提取、过滤，将滤液合并并进行真空干燥至粉末。
3.1.2 超声提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，超声波处理，过滤、滤渣，再用相同的提取溶剂在相同的条件下处理、过滤，将滤液合并并进行真空干燥至粉末。
3.1.3 微波提取法：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，置微波炉中处理一定的时间，取出冷却，再置微波炉中同样条件处理，如此重复6次，过滤，真空干燥至粉末。
3.1.4 渗漉法提取：称取原料适量，在一定pH值和温度下，加入定量的提取溶剂，置冰箱冷却，待结冰后取出，冰融化后装入渗漉筒，收集渗漉液真空干燥至粉末。
3.1.5 煎煮法提取：称取原料适量，加入适量80%工业乙醇(pH值为2.5)，煎煮一定的时间，过滤、滤渣，再用同样的方法煎煮相同时间，过滤，合并滤液真空干燥至粉末。
3.1.6 浸提法提取：称取原料适量，加入适量80%工业乙醇(pH值为2.5)，室温静置24h，过滤，滤液真空干燥至粉末。
4 绿原酸的分离、纯化工艺
将提取液过滤，浓缩，拌入聚酰胺，真空烘干，研磨，过筛，得粗品，经聚酰胺柱层析分离，得产品得率和产品纯度(绿原酸含量)。另外可以绿原酸含量为指标，分别考察聚酰胺目数、洗脱剂、物料比、柱径与柱长比、流速、洗脱剂用量等影响因素，优化出最佳的分离工艺参数。对分离后的产品，选用不同的溶剂进行重结晶，从中选出最佳的溶剂进行精制，得到绿原酸精品。当然，分离纯化还有很多方法，比如利用大孔树脂也同样可以纯化绿原酸。
5 绿原酸的含量测定
精确称取原料1.00g，加入30mL95%乙醇溶液，置于索氏提取器中回流提取，55℃回流提取4h，放置冷却至室温，过滤，定容至50 mL，摇匀，精确吸取提取液0.1 mL，稀释至4 mL，以95 %乙醇作对空白，在紫外分光光度计331 nm处测定吸光度A值，按绿原酸的标准曲线计算其绿原酸的含量。
6 绿原酸的提取工艺对比
6.1 提取溶剂的选取：提取溶剂主要有两种，即水和乙醇（工业乙醇），不同的提取方法可以采用不同的提取溶剂。乙醇的提取效果明显好于水，但水作为溶剂，虽然提取率相对较低，但对环境无污染，生产成本相对较低，工业生产切实可行，所以目前仍然是大工业生产普遍采用的提取方法。
6.2 提取方法的选取：采用相同的溶剂、不同的提取方法对绿原酸进行提取，提取率最高的方法为超声波法，其次为煎煮法、微波法、浸提法等［９］。
参考文献：
［1］张玲.山东金银花干花及鲜花挥发油成分研究.西北药学杂志，1998，13(6)：249-250.
［2］刘祥兰，刘重芳，张英等.金银花中绿原酸提取工艺的比较和优化研究.中成药，2000，22(6)：402.
［3］黄丽瑛.中药金银花化学成分的研究.中草药，1996，27(11)：645-647.
［4］娄红祥，郎伟君，吕木坚.金银花水溶性化合物的分离与结构确定.中草药，1996，27(4)：195.
［5］陈昌祥，王薇薇，倪伟等.金银花花蕾中三萜皂甙.云南植物研究，2000，22(2)：201-208.
［6］吴二喜.忍冬与灰毡毛忍冬微量元素的分析.中草药，1998，19(6)：45-47.
［7］李永梅，王天志，王志霄.细毡毛忍冬花蕾化学成分研究.中国中药杂志，2001，26(1)：45-47.
［8］符史良，钟杰平，李海霞等.从金银花中提取绿原酸的工艺研究.广东海洋大学学报，2007，27(4)：70-73.
［9］邓素兰，余继宏，邓芳琴.金银花中绿原酸提取工艺的对比.吉首大学学报(自然科学版)，2007，28(2)：109-112.