研究let-7e对单核细胞系THP-1细胞凋亡和细胞因子分泌的影响及其机制。
方法免疫荧光法检测cy3标记的mimic对照转染THP-1细胞转染率，qRT-PCR法检测let-7e mimic及对照、let-7e inhibitor及对照转染THP-1细胞后let-7e的表达；MTT法检测转染后THP-1细胞活性，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blot法检测let-7e靶基因IFI6(interferon alpha-inducible protein 6)、EZH2(enhancer of zeste homolog 2)、caspase-3的表达；转染48 h后THP-1细胞用LPS刺激2 h收集细胞培养上清，细胞因子芯片法检测上清中炎性因子的表达。
结果miRNA模拟物可以转染THP-1细胞，转染率约为75%，转染let-7e mimic 12 h、24 h、48 h后THP-1细胞的let-7e表达倍数分别为8.551±0.365、83.893±15.941、38.858±2.743，转染let-7e inhibitor 12 h、24 h、48 h后THP-1细胞的let-7e表达倍数分别为0.594±0.174、2.427±1.229、3.053±0.207；let-7e mimic转染组THP-1细胞活性升高、凋亡率降低；miranda数据库分析证实let-7e与EZH2、IFI6、caspase-3结合的mirSVR score分别为－0.1608、－0.5693、－0.9423，证实IFI6、EZH2、caspase-3可能是let-7e的靶基因；let-7e mimic转染组IFI6、EZH2、caspase-3表达都有所下降；let-7e mimic转染组CD154、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、CD54、IL-13、IL-1RA和IL-23表达有所下降。
结论let-7e有抗THP-1细胞凋亡的作用，可影响LPS诱导的细胞因子的表达。let-7e可能通过调节其靶基因caspase-3、IFI6、EZH2对THP-1细胞的生物学功能产生影响。