论文部分内容阅读
以重组质粒DET—CN为模板设计引物CASN1N和CASN2,PCR方法扩增约267bp的人血管能抑素N端1~89氨基酸基因片段,用EcoRI和Sal I双酶切将其克隆进pET-22b(+)载体获得重组表达质粒pET-22b(+)一CN,转化E.coliBL21(DE3),用IPTG诱导表达Canstatin-N,产物以包涵体形式存在。本文在摇瓶发酵条件下研究了诱导剂浓度、诱导培养时间对目标蛋白表达的影响,结果表明IPTG的最佳诱导浓度为0.1mmol/L;37℃下诱导培养2h时产物表达量最高。纯化获得的