【摘 要】
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目的:探讨雌激素受体(ER)β诱导结肠癌细胞自噬的作用机制。方法:将ERβ质粒转染人结肠癌细胞株HCT116(p53野生型)和SW480(p53突变型)后,通过荧光显微镜观察自噬现象;采用蛋
【机 构】
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上海交通大学医学院附属瑞金医院消化科,
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目的:探讨雌激素受体(ER)β诱导结肠癌细胞自噬的作用机制。方法:将ERβ质粒转染人结肠癌细胞株HCT116(p53野生型)和SW480(p53突变型)后,通过荧光显微镜观察自噬现象;采用蛋白印迹法检测LC3-Ⅱ蛋白、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、AMPK和p70S6K蛋白及相应磷酸化蛋白的表达变化;应用实时定量PCR法检测DRAM1、Sestrin1和Sestrin2的mRNA表达变化。结果:ERβ过表达能促进HCT116和SW480细胞发生自噬;LC3-Ⅱ和p-AMPK蛋白在HCT116细胞中分别上调了2.81倍和1.80倍(P<0.05);在SW480细胞中分别上调了1.70倍和2.48倍(P<0.05)。p-mTOR和p-p70S6K蛋白的表达水平在HCT116细胞中分别下降了29.52%和34.54%,在SW480细胞中分别下降37.89%和41.86%。除了Sestrin1 mRNA在SW480细胞中的表达无变化外,DRAM1和Sestrin2 mRNA的表达量在2种细胞中均显著上调(P<0.05)。结论:ERβ可通过对AMPK/mTORC1轴的调节作用诱导结肠癌细胞发生自噬。
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