【摘 要】
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目的探讨缝隙连接蛋白26(connexin 26,Cx26)对人高转移性肝癌HCCLM3细胞增殖、凋亡、迁移能力的影响。方法构建Cx26干扰慢病毒载体感染HCCLM3细胞,用嘌呤霉素筛选稳定干扰Cx2
【机 构】
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广西医科大学药学院药理学教研室,广西医科大学第一临床医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No 81260324);教育部高等学校博士学科点专项科研基金新教师类资助项目(No20124503120008);广西教育厅高校科硕项目(201106LX117);广西医科大学青年科学基金项目(NoGXMUYSF14)
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目的探讨缝隙连接蛋白26(connexin 26,Cx26)对人高转移性肝癌HCCLM3细胞增殖、凋亡、迁移能力的影响。方法构建Cx26干扰慢病毒载体感染HCCLM3细胞,用嘌呤霉素筛选稳定干扰Cx26表达的靶细胞,通过Realtime PCR和Western blot鉴定Cx26的mRNA和蛋白表达情况;用"parachute"荧光示踪法检测细胞缝隙连接(gap junction,GJ)功能;用MTT法、流式细胞术、Transwell迁移实验分别检测干扰Cx26对HCCLM3细胞增殖、凋亡、迁移能力的影响。结果 LV-Cx26组的Cx26 mRNA和蛋白表达明显低于LV-NC组和野生组细胞(P<0.01),并且LV-Cx26组的GJ功能也较LV-NC组和野生组明显减弱(P<0.01)。干扰Cx26可明显抑制HCCLM3细胞增殖(P<0.01),促进HCCLM3细胞凋亡(P<0.01),降低其体外迁移能力(P<0.01)。结论慢病毒靶向干扰Cx26表达可明显减弱其GJ功能,并抑制高转移性肝癌HCCLM3细胞增殖、迁移能力,促进凋亡,降低其恶性生物学特性。
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