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采用等电点法、盐析法、层析法对利用固定化技术生产纳豆激酶的发酵液中酶的提取进行了研究。研究发现,纳豆激酶的等电点为8.6,但是等电点法效果不好;在盐析法中发现,当先将发酵液调至45%的饱和度,离心取沉淀,然后再将上清液调至50%饱和度时,盐析效果最好;当控制洗脱流速在0.2mL/min进行层析时,纳豆激酶在洗脱时间为195~255min时达到分离。