论文部分内容阅读
目的
考察槲皮素对胆管癌是否具有治疗作用，并探索其作用机制。
方法常规培养人胆管癌细胞RBE和HUCCT1，分别给予不同浓度槲皮素处理，利用MTT法检测其对细胞增殖的影响；采用流式细胞术检测不同浓度槲皮素处理后细胞凋亡情况；根据细胞划痕实验观察其对细胞迁移的影响；根据实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中炎症因子的表达水平；Western blot检测槲皮素处理后细胞中目的蛋白的表达情况。
结果MTT结果显示，槲皮素能够剂量依赖性的抑制细胞增殖，其中1 000 μM槲皮素处理24 h后抑制作用最显著，RBE和HUCCT1细胞系抑制率分别为(53.14±0.74)%和(55.90±2.37)%；流式细胞仪检测结果表明，槲皮素显著促进细胞凋亡；细胞划痕结果提示，不同浓度槲皮素均可显著抑制细胞迁移；qRT-PCR结果揭示槲皮素能抑制RBE细胞中细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-a、MMP9及其上游P65在mRNA水平的表达(P<0.01)；Western blot结果表明不同浓度槲皮素可以抑制p-AKT、p-mTOR蛋白的表达。
结论槲皮素对胆管癌具有抑制作用，其可能通过抑制炎症因子的表达进而抑制AKT/mTOR信号通路最终抑制人胆管癌细胞的增殖、迁移，并促进胆管癌细胞凋亡。