【摘 要】
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目的 探讨抗肿瘤药物Scriptaid对小鼠体细胞核移植(SCNT)克隆胚体外发育的影响及提高移植效率的新途径. 方法 以C57/BL6小鼠卵母细胞为受体、卵丘细胞为供体进行SCNT,构建克隆胚,并采用数字随机表法将克隆胚分为5组,分别在含0 nmol/L(阴性对照组)、50、100、250、500 nmol/L Scriptaid的无钙激活剂中激活6h,然后在含相应浓度Scriptaid的KSO
【机 构】
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510282广州,南方医科大学珠江医院神经外科,广东神经外科研究所,广东省脑功能修复与再生重点实验室,510282广州,南方医科大学珠江医院神经外科,广东神经外科研究所,广东省脑功能修复与再生重点实验
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目的 探讨抗肿瘤药物Scriptaid对小鼠体细胞核移植(SCNT)克隆胚体外发育的影响及提高移植效率的新途径. 方法 以C57/BL6小鼠卵母细胞为受体、卵丘细胞为供体进行SCNT,构建克隆胚,并采用数字随机表法将克隆胚分为5组,分别在含0 nmol/L(阴性对照组)、50、100、250、500 nmol/L Scriptaid的无钙激活剂中激活6h,然后在含相应浓度Scriptaid的KSOM培养基中处理4h,最后转移至KSOM培养基中孵育 96h.观察、记录各组克隆胚的发育情况并进行囊胚细胞计数. 结果 各组克隆胚激活率和2-cell率之间差异无统计学意义(P＞0.05)；250 nmol/LScriptaid组的囊胚形成率(24.2％)和囊胚细胞数(56.27±2.43)与0 nmol/L组、50 nmol/L组、100nmol/L、500 nmol/L Scriptaid组之间(其囊胚形成率分别为5.3％、6.5％、9.4％和6.9％,囊胚细胞数分别为44.67±1.53、50.25±1.26、52.33±2.50和50.75±1.50)比较差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 250 nmol/L Scriptaid能有效提高小鼠SCNT克隆胚体外早期发育能力。
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目的 建立体外稳定表达红色荧光蛋白(RFP)的人脑胶质瘤干细胞.方法 将含有RFP基因的慢病毒(RFP-lentivirus)转染体外培养的人脑胶质瘤干细胞SU2,荧光显微镜下观察红色荧光表达情况;流式细胞仪测定转染前SU2细胞、转染后RFP-SU2细胞传代培养20代后红色荧光转染率:动态观察RFP-SU2单细胞的分裂及克隆形成情况；免疫荧光染色检测RFP-SU2细胞CD133、nestin的表达
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