【摘 要】
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目的:探讨持续缺氧阵发加剧的缺氧形式(PI hypoxia)导致人肺动脉内皮细胞(HPAECs)受损的具体机制,以及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮可能的保护作用.方法:将HPAECs置于持续15％供氧并间歇低氧至5％的PI hypoxia环境中培养72 h.PPARγ激动剂治疗组的HPAECs培养基中添加了5μM的罗格列酮并同样接受72 h PI hypoxia处理.通过慢病毒感染HPAECs,得到过表达Smad3的HPAECs并接受同样的缺氧处理.在细胞培养结束后使用免疫印迹技
【机 构】
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7300 兰州大学第一临床医学院;首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所呼吸与危重症医学科
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目的:探讨持续缺氧阵发加剧的缺氧形式(PI hypoxia)导致人肺动脉内皮细胞(HPAECs)受损的具体机制,以及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮可能的保护作用.方法:将HPAECs置于持续15％供氧并间歇低氧至5％的PI hypoxia环境中培养72 h.PPARγ激动剂治疗组的HPAECs培养基中添加了5μM的罗格列酮并同样接受72 h PI hypoxia处理.通过慢病毒感染HPAECs,得到过表达Smad3的HPAECs并接受同样的缺氧处理.在细胞培养结束后使用免疫印迹技术检测细胞裂解中PPARγ的相对含量;高通流式细胞仪测定HPAECs细胞凋亡;CCK-8法测定细胞活力;β-半乳糖苷酶染色衡量细胞老化程度;定量聚合酶链式反应检测端粒相对长度.结果:经历72 h PI hypoxia的HPAECs细胞裂解液中PPARγ表达显著下降.与正常供氧的HPAECs相比,接受72 h PI hypoxia的HPAECs高表达特异性细胞老化因子β-半乳糖苷酶,细胞凋亡显著增加,HPAECs细胞活性明显降低.与PI hypoxia的细胞相比,接受5 μM罗格列酮治疗的HPAECs细胞凋亡减轻,细胞活力改善,但是细胞老化程度并没有变化.PI hypoxia环境中培养的HPAECs细胞较正常供氧的HPAECs细胞端粒显著延长,且与接受罗格列酮治疗的细胞端粒长度没有差异.过表达Smad3能显著降低β-半乳糖苷酶,减少细胞凋亡,改善HPAECs细胞活性,但是并没有改变缺氧细胞PPARγ的表达水平.结论:PPARγ激动剂治疗能减轻PI hypoxia诱导的HPAECs细胞凋亡和细胞活力下降,但是并不能改善细胞老化水平.
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