草鱼脂多糖结合蛋白的分离纯化

来源 :西北农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:suli115296303
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脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding proteins,LBP)是机体对革兰氏阴性菌感染产生的可溶性急性期蛋白,结合并提呈LPS给细胞表面的模式识别受体,激发免疫反应.在本试验中,用低浓度嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染草鱼(Ctenopharyngodon idellus) 24 h后,抽取全血,离心,获得血浆.结合LBP活性检测,经硫酸铵沉淀、CM Sephadex C-50阳离子交换层析和DEAE Sephadex A-25阴离子交换层析后,分离纯化得到LBP.该蛋白对异硫氰酸荧光素标记的脂多糖(Fluorescein isothiocyanate labeled lipopolysaccharide,FITC-LPS)有较强的结合能力.在SDS-PAGE电泳后,考马斯亮蓝染色可见3条明显的带,分子量大约为68、53和48 kDa.同时探索一条简便分离纯化脂多糖结合蛋白的方法,为进一步研究LBP的功能奠定了基础.
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