探讨长链非编码RNA(lncRNA)RAB11B-AS1在骨肉瘤中的表达及其对骨肉瘤细胞增殖的影响及其作用机制。
方法采用2015年10月至2017年10月南方医科大学第三附属医院24对骨肉瘤组织及癌旁正常组织,用实时荧光定量PCR检测组织中RAB11B-AS1的表达水平。用慢病毒载体构建稳定过表达RAB11B-AS1的骨肉瘤细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞技术检测RAB11B-AS1对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响。建立裸鼠移植瘤模型,观察RAB11B-AS1对裸鼠移植瘤生长的影响。免疫组化和TUNEL实验检测RAB11B-AS1对骨肉瘤细胞体内增殖和凋亡的影响。荧光素酶报告基因探究RAB11B-AS1与RAB11B的关联。两组均数比较采用t检验。
结果骨肉瘤组织与癌旁组织的RAB11B-AS1相对表达量分别为0.010±0.015、0.022±0.030,差异有统计学意义(t=2.117,P=0.045)。过表达组肿瘤细胞增殖率变化幅度显著低于对照组(F=15.659,P<0.001)。流式细胞术显示过表达组细胞处于G0~G1期、S期、G2-M期的比例分别为62.6%±6.3%、21.4%±2.2%、16.3%±1.6%,而对照组则分别为59.4%±5.9%、25.9%±2.6%、15.5%±1.1%,其中两组细胞处于G0~G1期、S期的比例差异有统计学意义(t=17.124、17.321,均P<0.05);过表达组与对照组的肿瘤细胞凋亡率分别为12.7%±1.3%和10.3%±1.0%(t=17.321,P=0.003)。裸鼠成瘤显示过表达组的肿瘤生长慢于对照组(F=8.798, P=0.009)。RAB11B-AS1在骨肉瘤组织的表达与RAB11B表达呈负相关(r=-0.356,P=0.044)。
结论lncRNA RAB11B-AS1在骨肉瘤组织中低表达,且其过表达可通过降低RAB11B的表达进而抑制骨肉瘤的发生发展。