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【内容摘要】：采用菌丝生长速率法测定了4种杀菌剂对水稻纹枯病病菌的室内毒力。结果表明：20%丙硫唑悬浮剂和30%氟环唑悬浮剂毒力较高，其EC50分别为0. 228mg/L、0. 2904mg/L；其次为250g/L噻呋酰胺悬浮剂，EC50值为0. 6246g/L；250g/L苯醚甲环唑乳油的室内抑菌效果较差，EC50值为4. 4046g/L。用20%丙硫唑和250g/L噻呋酰胺悬浮剂按有效成分质量比5： 1、3： 1、1： 1、1： 3、1： 5、1： 7配比，其共毒系数分别为124. 96、164. 91、193. 19、224. 93、226. 61、274. 09，其中两者按有效成分质量1： 7时增效作用最为显著。
【关键词】：杀菌剂 水稻纹枯病 生长速率法 联合毒力
由立枯丝核菌引起的水稻纹枯病是水稻生产中发生最普遍、发生频率最高的三大重要病害之一[1-2]。水稻纹枯病又称云纹病，俗名花足干、烂脚瘟、眉目斑，多在高温、高湿条件下发生。在世界范围内每年造成超过10万吨的产量损失，严重时甚至减产50%[3-4]。目前化学防治仍然是防治水稻纹枯病的主要措施之一[5]。由于病原菌对已经使用的杀菌剂的敏感性不断降低[6]，故筛选新的杀菌剂品种或开展现有杀菌剂品种间的复配制剂的研究对于有效减缓其抗性的发展及提高杀菌剂的防治效果具有重要的生产实践意义。
一、材料与方法
（一）供试菌种
水稻纹枯病病菌（Rhizoctonia solani）由长江大学试验基地水稻病株分离纯化菌株而得。
（二） 供试药剂
1、20%丙硫唑悬浮剂由贵州道元生物技术有限公司生产；2、250g/L噻呋酰胺悬浮剂由浙江博仕达作物科技有限公司生产；3、30%氟环唑悬浮剂由陕西美邦农药有限公司生产；4、250g/L苯醚甲环唑乳油由永农生物科学有限公司生产。
（三） 供试培养基制备
先将马铃薯洗净去皮，再称取200g切成小块，加水煮烂（煮沸20～30分钟，能被玻璃杯戳碎即可），用八层纱布过滤并补充水至1000mL，再加入20g葡萄糖，搅拌均匀，边加热边加入20g琼脂待完全融化后分装于50mL锥形瓶封口，每瓶27mL，高温灭菌锅灭菌后冷却备用。
（四）毒力测定方法
试验采用生长速率法。供试药剂稀释成5个浓度梯度见表1。将每个浓度药剂取准确3mL药剂倒入上述经过融化并冷却至60℃的50mL锥形瓶培养基中，混合均匀后再分别倒入3个培养皿中凝固成含药平板。用直径5mm的打孔器从供试菌菌落边缘打取菌饼接种到上述含药平板上，置于25℃、L： D=12： 12的培养箱中培养48h后，用十字交叉法测量各菌落直径，取3次重复的平均值。数据采用DPS 进行统计分析求出毒力回归方程y=a+bx、关系数r和EC50
（五）联合毒力测定
选择20%丙硫唑悬浮剂和250g/L噻呋酰胺悬浮剂按有效成分质量比为5： 1、3： 1、1： 1、1： 3、1： 5、1： 7混合后进行联合毒力测定，按公式（1）、（2）、（3）计算毒力指数和共毒系数。
当CTC≧120时该复配剂表现增效。
二、结果与分析
（一）4种杀菌剂对水稻纹枯病病菌的毒力
4种杀菌剂中20%丙硫唑悬浮剂和30%氟环唑悬浮剂对水稻纹枯病菌菌丝生长抑制作用较强，有效抑制中浓度（EC50）分别为0. 2281mg/L、0. 2904mg/L；其次是250g/L噻呋酰胺悬浮剂，其EC50值为0. 6246mg/L；250g/L苯醚甲环唑乳油对水稻纹枯病的抑制效果较差，其EC50值为4. 4046mg/L（表2）。
（二）丙硫唑和噻呋酰胺复配对水稻纹枯病菌的联合毒力
丙硫唑和噻呋酰胺按质量比5： 1、3： 1、1： 1、1： 3、1： 5、1： 7配比，其共毒系数CTC值分别为124. 96、164. 91、193. 19、224. 93、226. 61、274. 09，结果显示两者按不同比例进行混合均表现为增效作用。其中兩者按有效成分质量1： 7混合是增效作用最为明显，共毒系数达274. 09（表3）。
三、结论与讨论
4种杀菌剂对水稻纹枯病菌的毒力按大小依次排序为：丙硫唑、氟环唑、噻呋酰胺和苯醚甲环唑。
用丙硫唑和噻呋酰胺按有效成分质量比5： 1、3： 1、1： 1、1： 3、1： 5、1： 7配比，混合均表现为增效作用，其中两者按有效成分质量1： 7混合是增效作用最为明显，共毒系数达274. 09。
丙硫唑属于内吸性苯并咪唑类衍生物新一代杀菌剂，具有预防保护、内吸治疗、渗透传导作用。杀菌谱广，对子囊菌纲（白粉病、炭疽病）、担子菌纲（锈病、黑粉病）和大多数半知菌纲（稻瘟病、炭疽病）引起的病害均有较好防效；对鞭毛菌引起的霜霉病、晚疫病等有一定的防效.同时室内生测及田间试验发现，对病毒病、细菌性病害也有良好的防效；并且具有促进细胞分裂、刺激植株生长，增强植物活力、提高光合作用，促进作物钙吸收的作用，与其它药剂复配混用增效作用显著。噻呋酰胺是琥珀酸酯脱氢酶抑制剂，抑制病菌三羧酸循环中琥珀酸去氢酶，导致菌体死亡。具有很强的内吸传导性能。丙硫唑和噻呋酰胺复配，不仅具有显著的增效租作用，也可以扩大杀菌谱，对延缓病原菌的抗药性，降低防病成本等具有重要的生产实践意义。
杀菌剂的毒力与药效间的关系较为复杂，虽然丙硫唑和噻呋酰胺在试验混合比例范围内显示不同程度的增效作用，但在田间条件下的生物活性尚有待于进一步开展药效试验予以验证。
【参考文献】
[1] 李明桃. 水稻纹枯病的病理学特征与防治方法[J]. 农业灾害研究，2012， 2（5）： 1-3.
[2] 李密，谢中才，胡康. 彭水县防治水稻纹枯病发生规律调查研究[J]. 南方农业，2013， 7（4）： 36-38.
[3] 胡春锦，李杨瑞，黄思良. 水稻抗纹枯病的研究新进展[J]. 中国农学通报，2004， 20（2）： 186-189.
[4] 仁春梅，高必达，何迎春，等. 水稻抗纹枯病的新进展[J]. 植物保护，2001， 27（4）： 32-36.
[5] 张穗，周梅光，宋万昌. 河南省固始等地纹枯病菌对井冈霉素的敏感性[J]. 植物保护学报，1999， 26（2）： 189-190.
[6] 程宏州，杨敬辉，狄化涛，等. 啶酰菌胺对水稻纹枯病菌的毒力及田间防效[J]. 江西农业学报，2013， 25（2）： 44-45.
【作者简介】
刘显良（1993—），男，现从事植物保护学研究
通讯作者：姚安庆，教授。
【关键词】：杀菌剂 水稻纹枯病 生长速率法 联合毒力
由立枯丝核菌引起的水稻纹枯病是水稻生产中发生最普遍、发生频率最高的三大重要病害之一[1-2]。水稻纹枯病又称云纹病，俗名花足干、烂脚瘟、眉目斑，多在高温、高湿条件下发生。在世界范围内每年造成超过10万吨的产量损失，严重时甚至减产50%[3-4]。目前化学防治仍然是防治水稻纹枯病的主要措施之一[5]。由于病原菌对已经使用的杀菌剂的敏感性不断降低[6]，故筛选新的杀菌剂品种或开展现有杀菌剂品种间的复配制剂的研究对于有效减缓其抗性的发展及提高杀菌剂的防治效果具有重要的生产实践意义。
一、材料与方法
（一）供试菌种
水稻纹枯病病菌（Rhizoctonia solani）由长江大学试验基地水稻病株分离纯化菌株而得。
（二） 供试药剂
1、20%丙硫唑悬浮剂由贵州道元生物技术有限公司生产；2、250g/L噻呋酰胺悬浮剂由浙江博仕达作物科技有限公司生产；3、30%氟环唑悬浮剂由陕西美邦农药有限公司生产；4、250g/L苯醚甲环唑乳油由永农生物科学有限公司生产。
（三） 供试培养基制备
先将马铃薯洗净去皮，再称取200g切成小块，加水煮烂（煮沸20～30分钟，能被玻璃杯戳碎即可），用八层纱布过滤并补充水至1000mL，再加入20g葡萄糖，搅拌均匀，边加热边加入20g琼脂待完全融化后分装于50mL锥形瓶封口，每瓶27mL，高温灭菌锅灭菌后冷却备用。
（四）毒力测定方法
试验采用生长速率法。供试药剂稀释成5个浓度梯度见表1。将每个浓度药剂取准确3mL药剂倒入上述经过融化并冷却至60℃的50mL锥形瓶培养基中，混合均匀后再分别倒入3个培养皿中凝固成含药平板。用直径5mm的打孔器从供试菌菌落边缘打取菌饼接种到上述含药平板上，置于25℃、L： D=12： 12的培养箱中培养48h后，用十字交叉法测量各菌落直径，取3次重复的平均值。数据采用DPS 进行统计分析求出毒力回归方程y=a+bx、关系数r和EC50
（五）联合毒力测定
选择20%丙硫唑悬浮剂和250g/L噻呋酰胺悬浮剂按有效成分质量比为5： 1、3： 1、1： 1、1： 3、1： 5、1： 7混合后进行联合毒力测定，按公式（1）、（2）、（3）计算毒力指数和共毒系数。
当CTC≧120时该复配剂表现增效。
二、结果与分析
（一）4种杀菌剂对水稻纹枯病病菌的毒力
4种杀菌剂中20%丙硫唑悬浮剂和30%氟环唑悬浮剂对水稻纹枯病菌菌丝生长抑制作用较强，有效抑制中浓度（EC50）分别为0. 2281mg/L、0. 2904mg/L；其次是250g/L噻呋酰胺悬浮剂，其EC50值为0. 6246mg/L；250g/L苯醚甲环唑乳油对水稻纹枯病的抑制效果较差，其EC50值为4. 4046mg/L（表2）。
（二）丙硫唑和噻呋酰胺复配对水稻纹枯病菌的联合毒力
丙硫唑和噻呋酰胺按质量比5： 1、3： 1、1： 1、1： 3、1： 5、1： 7配比，其共毒系数CTC值分别为124. 96、164. 91、193. 19、224. 93、226. 61、274. 09，结果显示两者按不同比例进行混合均表现为增效作用。其中兩者按有效成分质量1： 7混合是增效作用最为明显，共毒系数达274. 09（表3）。
三、结论与讨论
4种杀菌剂对水稻纹枯病菌的毒力按大小依次排序为：丙硫唑、氟环唑、噻呋酰胺和苯醚甲环唑。
用丙硫唑和噻呋酰胺按有效成分质量比5： 1、3： 1、1： 1、1： 3、1： 5、1： 7配比，混合均表现为增效作用，其中两者按有效成分质量1： 7混合是增效作用最为明显，共毒系数达274. 09。
丙硫唑属于内吸性苯并咪唑类衍生物新一代杀菌剂，具有预防保护、内吸治疗、渗透传导作用。杀菌谱广，对子囊菌纲（白粉病、炭疽病）、担子菌纲（锈病、黑粉病）和大多数半知菌纲（稻瘟病、炭疽病）引起的病害均有较好防效；对鞭毛菌引起的霜霉病、晚疫病等有一定的防效.同时室内生测及田间试验发现，对病毒病、细菌性病害也有良好的防效；并且具有促进细胞分裂、刺激植株生长，增强植物活力、提高光合作用，促进作物钙吸收的作用，与其它药剂复配混用增效作用显著。噻呋酰胺是琥珀酸酯脱氢酶抑制剂，抑制病菌三羧酸循环中琥珀酸去氢酶，导致菌体死亡。具有很强的内吸传导性能。丙硫唑和噻呋酰胺复配，不仅具有显著的增效租作用，也可以扩大杀菌谱，对延缓病原菌的抗药性，降低防病成本等具有重要的生产实践意义。
杀菌剂的毒力与药效间的关系较为复杂，虽然丙硫唑和噻呋酰胺在试验混合比例范围内显示不同程度的增效作用，但在田间条件下的生物活性尚有待于进一步开展药效试验予以验证。
【参考文献】
[1] 李明桃. 水稻纹枯病的病理学特征与防治方法[J]. 农业灾害研究，2012， 2（5）： 1-3.
[2] 李密，谢中才，胡康. 彭水县防治水稻纹枯病发生规律调查研究[J]. 南方农业，2013， 7（4）： 36-38.
[3] 胡春锦，李杨瑞，黄思良. 水稻抗纹枯病的研究新进展[J]. 中国农学通报，2004， 20（2）： 186-189.
[4] 仁春梅，高必达，何迎春，等. 水稻抗纹枯病的新进展[J]. 植物保护，2001， 27（4）： 32-36.
[5] 张穗，周梅光，宋万昌. 河南省固始等地纹枯病菌对井冈霉素的敏感性[J]. 植物保护学报，1999， 26（2）： 189-190.
[6] 程宏州，杨敬辉，狄化涛，等. 啶酰菌胺对水稻纹枯病菌的毒力及田间防效[J]. 江西农业学报，2013， 25（2）： 44-45.
【作者简介】
刘显良（1993—），男，现从事植物保护学研究
通讯作者：姚安庆，教授。