杨树枯萎病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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为建立荧光定量PCR检测杨树枯萎病的方法和明确前期分离的拮抗菌N6-34对杨树枯萎病致病菌尖孢镰刀菌的作用,本试验采用常规PCR法扩增尖孢镰刀菌的特异性片段,将此片段与载体连接构建质粒,提取质粒DNA在实时荧光定量PCR仪上采用两步法进行扩增并绘制实时荧光定量PCR标准曲线,同时对杨树进行不同灌根处理(T1:1×106cfu/mL的尖孢镰刀菌孢子悬液和未接N6-34菌株的发酵培养液各20mL;T2:1×106cfu/mL的尖孢镰刀菌孢子悬液和灭活的N6-34菌株发酵培养液各20mL;T
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