【摘 要】
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目的通过改进溶液Ⅱ配方,消除质粒DNA提取中的不可逆变性条带,提高质粒DNA提取的质量与得率。方法取氨苄LB液体培养液中培养好的DH5α(pCDNA3),以NaOH系列梯度浓度/甘氨酸-Na
【机 构】
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华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系
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目的通过改进溶液Ⅱ配方,消除质粒DNA提取中的不可逆变性条带,提高质粒DNA提取的质量与得率。方法取氨苄LB液体培养液中培养好的DH5α(pCDNA3),以NaOH系列梯度浓度/甘氨酸-NaOH缓冲液体系配制溶液Ⅱ,依据文献提供的方法,小量提取制备质粒DNA,以凝胶电泳、紫外分光光度计及酶切验证提取效果。结果在NaOH浓度为0.10mol/L下,不可逆变性条带基本得到消除,超螺旋DNA的提取纯度和得率均得到明显提高。结论改变溶液Ⅱ的碱性条件,可以制备高质量的质粒DNA。
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