【摘 要】
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[目的]筛选并获得产α-淀粉酶的菌株,并初步研究其酶学性质.[方法]从红树林土壤样品中筛选到一株产、α-淀粉酶的菌株约氏黄杆菌HSL13,克隆了其α～淀粉酶基因Fjamy2,构建了pPI
【机 构】
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武汉轻工大学生物与制药工程学院,湖北武汉430023
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[目的]筛选并获得产α-淀粉酶的菌株,并初步研究其酶学性质.[方法]从红树林土壤样品中筛选到一株产、α-淀粉酶的菌株约氏黄杆菌HSL13,克隆了其α～淀粉酶基因Fjamy2,构建了pPICZαA-Fjamy2重组表达载体,并在毕赤酵母中表达,然后对该淀粉酶的底物特异性、酶学性质和酶学动力学参数进行了测定.[结果]淀粉酶基因Fjamy2的最适温度为40℃,在10℃～30℃内比较稳定;最适pH为5.0,在pH5.0～11.0内较稳定;其对多种淀粉底物以及糖原、糊精等均有良好的水解作用;对其动力学进行测定得知Vmax为0.084 1 pmol/min,Km为3.35 mg/mL,Kcat为45.35s-1.[结论]新型淀粉酶Fjamy2在中低温酸性条件下具有优良的活性,最适条件下比酶活为81 U/mg,成功地实现了在毕赤酵母中的异源表达.
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