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[目的]获得敲除肌肉生长抑制素（MSTN）基因的猪胎儿成纤维细胞。[方法]打靶载体的构建：以胎D为正筛选基因、HSY-tk为负筛选基因。在Neo的两侧分别插入同源长臂和同源短臂。同源长臂5382bp，包含MSTN基因的部分5’端，全部的exon1，intron1和exon2及大部分intton2；同源短臂844bp，包含部分exon3及3，端的部分序列。取35d胎龄的大白猪，用胰酶消化法，分离胎儿成纤维细胞并对其进行培养和建系．采用脂质体法将打靶载体导入胎儿成纤维细胞中，转染后的细胞采用250μg