【摘 要】
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目的 构建人神经营养素 - 3(NT 3)的真核表达质粒 .方法 由于NT 3基因中无内含子 ,因此直接运用PCR技术从人基因组DNA中分离出人NT 3完整基因 ,与 pcDNA3.1(- )载体重组并
【机 构】
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四川大学生命科学院细胞生物学教研室四川大学生命科学院细胞生物学教研室成都
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目的 构建人神经营养素 - 3(NT 3)的真核表达质粒 .方法 由于NT 3基因中无内含子 ,因此直接运用PCR技术从人基因组DNA中分离出人NT 3完整基因 ,与 pcDNA3.1(- )载体重组并测序 ,获得pcDNA NT3.用脂质体介导法将重组质粒转染人胚肾 2 93A细胞株 ,经G4 18筛选后 ,用RT PCR和免疫荧光法在转录和翻译两个水平上检测表达产物 .结果 测序证实所获得的是正确的重组质粒 .它的转录和翻译产物均可在细胞中检测到 .结论 成功地进行了NT 3的克隆与真核表达 ,NT
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