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考察了10 L罐规模条件下pH、温度、装液量以及碳源流加模式对毕赤酵母高密度培养表达鸡α-干扰素的影响，确定了最优的生产工艺：在pH5.5、28℃、40%装液量条件下，当初始碳源耗尽的情况下，进行甘油和甲醇混合（流加体积速率比为20∶1）脉冲流加，产物鸡α-干扰素抗病毒活性最高，可达3×106 IU/mL。将该工艺在50 L发酵罐规模条件下进行放大，重复20批，结果表明此过程重复性较好，且目的蛋白表达量稳定，具有工业化生产的实际应用价值。