【摘 要】
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旋毛虫新生幼虫期特异性G10-7基因从PBK-CMV-G10-7重组质粒中亚克隆到pET-28b(+)原核表达载体上,成功地构建了重组表达质粒pET-28b-G10-7.将其转化到大肠杆菌DE3感受态细胞中
【机 构】
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解放军军需大学,兰州军区兰州总医院,法国食品卫生安全局
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旋毛虫新生幼虫期特异性G10-7基因从PBK-CMV-G10-7重组质粒中亚克隆到pET-28b(+)原核表达载体上,成功地构建了重组表达质粒pET-28b-G10-7.将其转化到大肠杆菌DE3感受态细胞中,经IPTG诱导表达,其细菌裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子质量约为34 000的目的蛋白带,且随诱导时间的延长蛋白表达量逐渐增加,诱导4 h达到峰值,薄层扫描结果显示,目的蛋白占菌体总蛋白的61.7%.Western-blotting检测显示,此蛋白可被感染旋毛虫家猪阳性血清所识别,表明该蛋白具有良好的抗原性.
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