【摘 要】
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目的 构建真核表达载体pIRES-IL-24-TRAIL,探讨其对肝癌细胞迁移和凋亡的影响.方法 以人胎盘组织总RNA为模板,采用RT-PCR二步法,扩增TRAIL的cDNA序列,将其克隆入pIRES载体,扩
【机 构】
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深圳市第四人民医院普外科,广东深圳,518033;南方医科大学珠江医院普外科,广东广州,510515
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目的 构建真核表达载体pIRES-IL-24-TRAIL,探讨其对肝癌细胞迁移和凋亡的影响.方法 以人胎盘组织总RNA为模板,采用RT-PCR二步法,扩增TRAIL的cDNA序列,将其克隆入pIRES载体,扩增IL-24的cDNA序列,将其克隆入pIRES-TRAIL载体,构建其真核瞬时表达载体pIRES-IL-24-TRAIL,以Lipofectamine2000转染技术,将TRAIL、IL-24基因导入肝癌细胞Bel-7402和PLC,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,划痕实验比较不同组间细胞迁移情况.结果 ①克隆到TRAIL、IL-24基因的cDNA序列,成功构建其真核表达载体;②流式细胞仪发现,实验组比对照组凋亡率高(P＜0.05);③细胞划痕实验显示实验组细胞迁移能力明显低于对照组(P＜0.05).结论 pIRES-IL-24-TRAIL构建成功,并能诱导肝癌细胞凋亡、降低其迁移能力.
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