【摘 要】
:
目的 构建东方田鼠肺脏T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选东方田鼠抗血吸虫感染抗性相关基因奠定基础.方法 用TRIzol试剂提取东方田鼠肺脏总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDN
【机 构】
:
上海师范大学生命与环境科学学院,中国农业科学院上海兽医研究所、国家防治动物血吸虫病专业实验室、农业部动物寄生虫学重点开放实验室
【基金项目】
:
科技部科技基础条件平台建设计划;上海市科委资助项目
论文部分内容阅读
目的 构建东方田鼠肺脏T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选东方田鼠抗血吸虫感染抗性相关基因奠定基础.方法 用TRIzol试剂提取东方田鼠肺脏总RNA,分离纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA.在双链cDNA 末端加上定向EcoRⅠ/Hind Ⅲ接头并用EcoRⅠ和Hind Ⅲ消化,使其两端分别带EcoRⅠ和Hind Ⅲ黏性末端.用Mini Column纯化,收集300 bp以上的双链cDNA 片段,再连接于带有EcoRⅠ和Hind Ⅲ末端的T7 Select 10-3b载体,经体外包装后,以BLT5403为受体菌构建T7噬菌体展示cDNA文库.结果 经测定,库容量为1.5×106 pfu,扩增后文库滴度为1.1×1012 pfu/ml.对从原始文库中随机挑取的100个噬菌斑进行PCR鉴定,重组率为91%,阳性克隆片段长度分布在200~1500 bp,其中有90%的插入片段>300 bp.结论 成功构建了东方田鼠肺脏T7噬菌体展示cDNA文库.
其他文献
生猪屠宰管理问题事关群众生活,影响全局,任何地方都不能掉以轻心.县区是生猪生产和屠宰管理的贯彻者、执行者,又是平稳市场肉价的管理者和维护者.县区政府、商贸主管部门抓
近年来有关脑胶质瘤分子遗传学机制的研究对胶质瘤的分类及其治疗具有十分重要的意义。随着对脑胶质瘤分子遗传学异常的研究,加深了我们对这些肿瘤生物学特点的理解。目前认
目的 探讨白念珠菌菌丝相与酵母相ERG11基因间的差异.方法 将16株同一亲本来源、对氟康唑敏感性不同的白念珠菌(CA-1~CA-9、CA-11~CA-17)进行菌丝相与酵母相培养后,分别抽提基
目的探讨剂量体积参数与放疗后肺功能变化关系,并预测肺癌患者放疗后的肺功能。方法39例未手术肺癌患者在放疗前1周、放疗后2~4个月分别进行肺功能检测。观测肺功能指标:FVC、
目的 探讨音乐疗法能否减轻乳腺活检手术后患者等待病理报告期间的焦虑状况,并使其生命体征保持平稳.方法 选择在手术室等待活检结果的乳腺科局麻手术患者,随机分为试验组(n=
目的:探讨血浆凝血因子Ⅶ(FⅦ)基因R353Q多态性的分布与河南汉族人冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)的关系。方法:利用PCR-RFLP分析技术,检测264例健康对照组和207例河南汉族CH
随着机构仓储(IR,Institutional Repositories)的发展日益成熟,越来越多的图书馆利用协会或是区域关系为机构仓储的发展提供资助、方法、专门技术.对于那些没有专门的机构、
为了以最少的条件属性值获取信息系统的决策规则,我们可以用值约简算法删除和过滤冗余的条件属性值.在介绍基本值约简算法的基础上,对原算法考虑的情况进行了适当的补充,主要
刨煤工作面设备回撤前劈帮工艺多种多样,各有所长,但利用综掘机后装短带式输送机来进行劈帮还是创举,介绍了新的工艺流程和短带式输送机的设计方案及结构特征,并对应用效果和
目的总结经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术中冠状动脉穿孔的临床特点。方法回顾性分析2004年4月至2006年8月阜外心血管病医院PCI术中发生的32例冠状动脉穿孔患者的临床资料。结果