中国水仙高分子量核DNA提取方法的建立

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以中国水仙(Narcissus tazettaL.var.Chinensis Roem)黄化叶片为材料,比较了2种提取方法对高分子量核DNA(HMW-DNA)制备效果的影响.结果表明,改良Zhang法与Peterson法相比,前者更适合于中国水仙叶片HMW-DNA的提取.将得到的细胞核用低熔点琼脂糖包埋,琼脂糖小块用蛋白酶K最适消化时间为24h,脉冲场凝胶电泳分析结果表明,所获得的HMW-DNA大于1 Mb,这些核DNA能够被限制性内切酶消化;用Southern blot检测,结果表明没有其它细胞器DNA的污染;适合于中国水仙BAC基因组文库的构建.
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